細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人肺腺癌細胞;NCI-H441價格準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,人肺腺癌細胞;NCI-H441價格貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多腫瘤細胞。 產品描述: 細胞名稱 人肺腺癌細胞;NCI-H441價格 形態特性上皮細胞樣 生長特性貼壁生長 特征特性該細胞于1982年取自一位男性肺狀腺癌患者的心包夜,該細胞系表達主要表面活性劑的脫輔基蛋白(SP-A)的mRNA和蛋白質。電子顯微鏡顯示細胞多層薄片狀和細胞質結構類似無纖毛分泌細胞顆粒。細胞可以在含或不含血清軟瓊脂克隆。 培養條件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS 傳代方法1:3傳代,2-3天傳一代 傳代情況PN5 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測陰性 STRAMEL:X,Y;CSF1PO:11,12;D12S391:19.3,19.3;D13S317:9,9;D16S539:9,13;D18S51:18,19;D19S433:14,14;D21S11:32.2,32.2;D2S1338:17,19;D2S441:14,14;D3S1358:18,18;D5S818:11,12;D6S1043:17,17;D7S820:10,10;D8S1179:8,14;FGA:24,25;PentaD:10,12;PentaE:12,12;TH01:9.3,9.3;T 同工酶 染色體
注意事項: ?1.一般客戶拿到人肺腺癌細胞;NCI-H441價格后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 *Anti-FGF5/FITC熒光素標記纖維母細胞生長因子5抗體IgG規格:0.2ml *Anti-KGF/FGF-7/FITC熒光素標記角質形成細胞生長因子受體/纖維母細胞生長因子-7抗體IgG規格:0.2ml *Anti-FGF-8/HBGF-8/FITC熒光素標記成纖維細胞生長因子-8/纖維母細胞生長因子-8抗體IgG規格:0.2ml *Anti-FGF-13/FITC熒光素標記抗纖維母細胞生長因子-13抗體IgG規格:0.2ml *Anti-FGF-10/FITC熒光素標記成纖維細胞生長因子-10/纖維母細胞生長因子-10抗體IgG規格:0.2ml *Anti-bFGF-R/FGFR1/FITC熒光素標記纖維母細胞生長因子受體1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-PLCG1/PLCgamma1/FITC熒光素標記磷酯酶Cγ1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-PLCG2/PLCgamma2/FITC熒光素標記磷酯酶Cγ2抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Crkp38/CrkII/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠Crkp38抗體IgG規格:0.2ml *Anti-PLCbeta3/PhospholipaseCbeta3/FITC熒光素標記磷酯酶Cβ3抗體IgG規格:0.2ml 人肺腺癌細胞;NCI-H441價格*Anti-4E-BP1/EIF4EBP1/FITC熒光素標記4E結合蛋白1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-4EBP1(phosphoSer64)/FITC熒光素標記磷酸化4E結合蛋白1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-4EBP1(phosphoThr37/46)/FITC熒光素標記磷酸化4E結合蛋白1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-phospho-4EBP1(Ser65/Thr70)/FITC熒光素標記磷酸化eIF4E結合蛋白抗體IgG規格:0.2ml *Anti-14-3-3/RBITC紅色熒光素羅丹明標記14-3-3抗體IgG規格:0.2ml *Anti-5-HT/FITC熒光素標記5-羥色胺抗體IgG規格:0.2ml *Anti-5-HT/RBITC紅色羅丹明標記5-羥色胺抗體IgG規格:0.2ml *Anti-5-HTR1A/FITC熒光素標記5-羥色胺受體1A抗體IgG規格:0.2ml *Anti-5-HTR1B/FITC熒光素標記5-羥色胺受體1B抗體IgG規格:0.2ml *Anti-5-HTR2A/FITC熒光素標記5-羥色胺受體2A抗體IgG規格:0.2ml 冷凍保存細胞之方法: 人肺腺癌細胞;NCI-H441價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |