人肝癌亞力山大細胞；PLC/PRF/5培養

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產品描述：
細胞名稱 人肝癌亞力山大細胞；PLC/PRF/5培養
形態特性上皮細胞

生長特性貼壁生長

特征特性該細胞系分泌乙肝病毒表面抗原（HBsAg）。此細胞系原先被支原體污染，后用BM-cycline去除支原體。

培養條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優質胎牛血清，10%

傳代方法消化5-10分鐘。1:2。3-4天長滿。

傳代情況P(78+5)

凍存條件*培養基+8%DMSO

支原體檢測陰性

STRAmelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:11,12；D16S539:13；D18S51:17；D19S433:11,13；D21S11:30,33.2；D2S1338:19,22；D3S1358:15；D5S818:12；D7S820:9,11；D8S1179:13,16；FGA:19.2,25；TH01:8；TPOX:8；vWA:15,16

同工酶

染色體

冷凍保存細胞之方法：
人肝癌亞力山大細胞；PLC/PRF/5培養冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）人肝癌亞力山大細胞；PLC/PRF/5培養準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
*Anti-CRMP2/Dpysl2(collapsinresponsemediatorprotein-2)/FITC熒光素標記抗二氫嘧啶酶樣2抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-Phospho-CRMP-2(Thr514)/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CRP/Biotin生物素化C-反應蛋白抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CRP/FITC熒光素標記C-反應蛋白抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CRP/HRP辣根過氧化物酶標記鼠抗人C-反應蛋白單克隆抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CRTAM/FITC熒光素標記CRTAM抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-C-SKI/FITC熒光素標記抗C-SKI抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CSIG/FITC熒光素標記細胞衰老抑制基因抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CSP/FITC熒光素標記環子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CT/FITC熒光素標記降鈣素抗體IgG規格：0.2ml
人肝癌亞力山大細胞；PLC/PRF/5培養*Anti-SYT3突觸結合蛋白3抗體規格：0.1ml

*Anti-T3*狀腺素T3抗體規格：0.2ml

*Anti-SynapsinI神經突觸素1抗體規格：0.1ml

*Anti-phospho-SynapsinI(Ser553)磷酸化神經突觸素1抗體規格：0.1ml

*Anti-phospho-SynapsinI(Ser9)磷酸化神經突觸素1抗體規格：0.1ml

*Anti-SynapsinII神經突觸素2抗體規格：0.2ml

*Anti-T3*狀腺素T3抗體規格：0.2ml

*Anti-TACR3速激肽受體3抗體規格：0.2ml

*Anti-TAK1轉化生長因子β活化激酶1規格：0.2ml

*Anti-Phospho-TAK1(Ser412)磷酸化轉化生長因子β活化激酶1規格：0.1ml
注意事項：
?1.一般客戶拿到人肝癌亞力山大細胞；PLC/PRF/5培養后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養液吸出，留下10ml培養液繼續培養；超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題，不予以重發的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態不好，不重發；
（3）非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發；
（4）細胞狀態不好，未提供細胞培養前3天照片的，不重發；
（5）細胞培養時經其它處理的，不重發；
（6）細胞收到2天內，未告知，不重發；
（7）視具體情況而定。