細胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)人子宮頸鱗狀細胞癌細胞;SiHa價格準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,人子宮頸鱗狀細胞癌細胞;SiHa價格貨期短,價格優(yōu),售后齊全。點擊進入了解更多腫瘤細胞。 產(chǎn)品描述: 細胞名稱 人子宮頸鱗狀細胞癌細胞;SiHa價格 形態(tài)特性上皮細胞 生長特性貼壁生長 特征特性該細胞系建自一個日本病人的外科手術(shù)的原位組織樣品。電鏡觀察表明在細胞連接處有典型的橋粒,在胞質(zhì)中有豐富的張力絲。在裸鼠中,此細胞能 成低分化的表皮樣癌(三級)。癌基因:PRB和P53陽性。 培養(yǎng)條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10% 傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 傳代情況P(6+5) 凍存條件*培養(yǎng)基+8%DMSO 支原體檢測陰性 STRAmelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:11;D16S539:12;D18S51:15;D19S433:14.2;D21S11:29,31;D2S1338:24;D3S1358:16,17;D5S818:9;D7S820:10;D8S1179:13,16;FGA:21;TH01:6,9;TPOX:8;vWA:14,17 同工酶 染色體
注意事項: ?1.一般客戶拿到人子宮頸鱗狀細胞癌細胞;SiHa價格后,應(yīng)該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。 細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 *Anti-CyclinD2/FITC熒光素標(biāo)記周期素D2抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CyclinD3/FITC熒光素標(biāo)記周期素D3抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CyclinE/FITC熒光素標(biāo)記周期素E/原癌基因抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-phospho-CyclinE(Thr62)/FITC熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素E抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CyclinF/FITC熒光素標(biāo)記周期素F抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CyclinG/FITC熒光素標(biāo)記周期素G抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CyclinH/FITC熒光素標(biāo)記周期素H抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Cygb/FITC熒光素標(biāo)記細胞球蛋白抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CYP450/FITC熒光素標(biāo)記細胞色素P450單氧化酶抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CYP1A1/FITC熒光素標(biāo)記細胞色素P4501A1抗體IgG規(guī)格:0.2ml 人子宮頸鱗狀細胞癌細胞;SiHa價格*Anti-TGFBetaR1/TGFBR1轉(zhuǎn)移生長因子β受體1抗體規(guī)格:0.1ml *Anti-TGFbetaR2/TGFBR2轉(zhuǎn)移生長因子β受體2抗體規(guī)格:0.1ml *Anti-TGFBetaR3轉(zhuǎn)移生長因子β受體3抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-TGM3轉(zhuǎn)谷氨酰酶3抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-Thioster-containingprotein1按蚊硫酯包含蛋白-1抗體規(guī)格:1ml *Anti-ERdj5ERdj5蛋白抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-thrombinII凝血酶Ⅱ抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-phospho-p38MAPK/MAPK14(pThr180/pTyr182)磷酸化p38MAPK抗體規(guī)格:0.1ml *Anti-Tie1血管生成素受體1抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-Thy-1/CD90CD90抗體規(guī)格:0.1ml 冷凍保存細胞之方法: 人子宮頸鱗狀細胞癌細胞;SiHa價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |