人結直腸腺癌上皮細胞；DLD-1培養(yǎng)

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產品描述：
細胞名稱 人結直腸腺癌上皮細胞；DLD-1培養(yǎng)
形態(tài)特性上皮細胞

生長特性貼壁生長

特征特性DLD-1是1977-1979年間D.L.Dexter和同事分離的兩株結直腸腺癌細胞株中的一株。在ATCC和其它地方進行的DNAfingerprinting和染色體組型分析表明這株細胞與HCT-15(CCL-225)相似，說明這兩者是來自同一個人的不同克隆。他們的遺傳起源可通過DNAfingerprinting證實，但染色體組型分析顯示它們缺乏染色體標記*改變或數(shù)目上*改變。細胞的CSAp陰性(CSAp-)。DLD-1細胞的p53抗原表達呈陽性(p53抗原產生了一個C->

培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質胎牛血清，10%

傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。

傳代情況PN5

凍存條件*培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測陰性

STRAmelogenin:X,Y；CSF1PO:11,12；D13S317:8,11；D16S539:12,13；D18S51:11,17；D19S433:14,16；D21S11:29,32.2；D2S1338:17,25；D3S1358:17；D5S818:13；D7S820:10,12；D8S1179:15；FGA:22；TH01:7,9.3；TPOX:8,11；vWA:18,19

同工酶

染色體

冷凍保存細胞之方法：
人結直腸腺癌上皮細胞；DLD-1培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）人結直腸腺癌上皮細胞；DLD-1培養(yǎng)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
*Anti-CG6856/CG6856-PA/FITC熒光素標記兔抗果蠅CG6856-PA抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CGB/FITC熒光素標記嗜鉻粒素B抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CGP-39/YKL-40/FITC熒光素標記軟骨糖蛋白39抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CGRP/FITC熒光素標記降鈣素基因相關肽抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-ChAT/FITC熒光素標記ChAT抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CHK1/FITC熒光素標記抗細胞周期檢測點激酶1抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CHK2/Cds1/FITC熒光素標記抗細胞周期檢測點激酶2抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-Phospho-CHK2(Thr68)/FITC熒光素標記磷酸化細胞周期檢測點激酶2抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-Chloramphenicol/FITC熒光素標記抗氯霉素抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-ChRM1/FITC熒光素標記毒蕈堿型乙酰膽堿受體M1抗體IgG規(guī)格：0.2ml
人結直腸腺癌上皮細胞；DLD-1培養(yǎng)*Anti-SLC39A6SLC39A6抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Slug鋅指轉錄因子Slug抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-SLC40A1/FPN1細胞膜鐵轉運蛋白SLC40A1抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-SLC44A1/CD92溶質轉運蛋白家族44成員1抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Smad1細胞信號轉導分子Smad-1抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Phospho-Smad1(Ser206)磷酸化細胞信號轉導分子Smad-1抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Phospho-Smad1/5(Ser463/465)磷酸化細胞信號轉導分子Smad-1/5抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Smad2/3細胞信號轉導分子Smad-2/3抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-phospho-Smad2(Ser465)磷酸化Smad2抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Smad4Smad4抗體規(guī)格：0.2ml
注意事項：
?1.一般客戶拿到人結直腸腺癌上皮細胞；DLD-1培養(yǎng)后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細胞培養(yǎng)時經其它處理的，不重發(fā)；
（6）細胞收到2天內，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。