人紅系白血病細(xì)胞；TF-1圖片

冷凍保存細(xì)胞之方法：
人紅系白血病細(xì)胞；TF-1圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品描述：
細(xì)胞名稱 人紅系白血病細(xì)胞；TF-1圖片
形態(tài)特性淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性懸浮生長(zhǎng)

特征特性該細(xì)胞系1987年由KitamuraT等建立，源于一名35歲日本男性的肝素化骨髓抽取樣本，該患者具有嚴(yán)重的全血細(xì)胞減少癥。細(xì)胞生長(zhǎng)*依賴于IL-3或GM-CSF，對(duì)IL-5無(wú)反應(yīng)。多種淋巴因子和細(xì)胞因子對(duì)該細(xì)胞都有作用，如：IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。該細(xì)胞不表達(dá)血型糖蛋白A和碳酸酐酶I。由該細(xì)胞的

態(tài)和細(xì)胞化學(xué)特征及珠蛋白基因的組成性表達(dá)，顯示該細(xì)胞屬于紅系。氯高鐵血紅素和δ氨基乙酰丙酸誘導(dǎo)細(xì)胞合成血紅蛋白，TPA刺激細(xì)胞向巨噬細(xì)胞樣細(xì)胞分

培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；8ng/mlrHUGM-csf

傳代方法維持細(xì)胞濃度在3×104~5×105cells/ml；2~3天換液1次。

傳代情況U

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè)陰性

STR

同工酶

染色體

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）人紅系白血病細(xì)胞；TF-1圖片準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項(xiàng)：
?1.一般客戶拿到人紅系白血病細(xì)胞；TF-1圖片后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
*Anti-CDK9/FITC熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶9抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-Phospho-CDK9(Thr186)/FITC熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素依賴性激酶9抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CD133/RBITC紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記兔抗人、大、小鼠和果蠅CD133抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CD46/RBITC紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記CD46膜輔蛋白抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-Cdkn1c/p57/Kip2/FITC熒光素標(biāo)記周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-Phospho-p57Kip2(Thr310)/FITC熒光素標(biāo)記磷酸化周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CDX2/FITC熒光素標(biāo)記尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CEA/FITC熒光素標(biāo)記癌胚抗原抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-CEBP-Alpha/CLEBPAlpha/FITC熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPα抗體IgG規(guī)格：0.2ml

*Anti-Phospho-C/EBPbeta(Ser105)/FITC熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPβ抗體IgG規(guī)格：0.2ml
人紅系白血病細(xì)胞；TF-1圖片*Anti-SHIP1SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Phospho-SHIP1(Tyr1020)磷酸化SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-SHP-1造血細(xì)胞磷酸酶抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-PTPN4/MEG1蛋白酪氨酸磷酸酶非受體型4抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-SHP2/SHIP2/PTPN11蛋白酪氨酸磷酸酶非受體型11抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Phospho-SHIP2(Tyr1135)磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Phospho-SHIP2(Ser576)磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Phospho-SHIP2(Tyr542)磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Phospho-SHIP2(Tyr986/987)磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Phospho-SHIP2(Tyr580)磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體規(guī)格：0.1ml
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