細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2圖片準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。 二.細(xì)胞處理: 1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2圖片貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。點(diǎn)擊進(jìn)入了解更多腫瘤細(xì)胞。 產(chǎn)品描述: 細(xì)胞名稱 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2圖片 形態(tài)特性上皮細(xì)胞 生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng) 特征特性這株細(xì)胞分離自直腸原位癌。當(dāng)長(zhǎng)到滿時(shí),細(xì)胞表現(xiàn)出特征性的腸上皮細(xì)胞分化。Caco-2細(xì)胞表達(dá)維甲酸結(jié)合蛋白I和維甲酸結(jié)合蛋白II,并呈角質(zhì)蛋白陽(yáng)性。 培養(yǎng)條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10% 傳代方法消化15-20分鐘。1:2。4-5天長(zhǎng)滿。 傳代情況P(17+5) 凍存條件*培養(yǎng)基+8%DMSO 支原體檢測(cè)陰性 STRAmelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:8,12;D16S539:11,12;D18S51:17;D19S433:15,16;D21S11:30;D2S1338:21;D3S1358:15;D5S818:13;D7S820:8,11;D8S1179:15;FGA:21;TH01:7;TPOX:8;vWA:17 同工酶 染色體
注意事項(xiàng): ?1.一般客戶拿到人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2圖片后,應(yīng)該注意什么? 客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。 收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。 細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 *Anti-CD158i/KIR2DS4/FITC熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DS4抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CD147/EMMPRIN/FITC熒光素標(biāo)記細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CD151/MER2/PETA-3/FITC熒光素標(biāo)記CD151抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CD155/PVR/FITC熒光素標(biāo)記CD155抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CD160/By55/FITC熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞受體BY55抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CD161/NK1.1/FITC熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠CD161抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CD163/M130/FITC熒光素標(biāo)記CD163抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CD166/ALCAM/FITC熒光素標(biāo)記活化白細(xì)胞粘附分子抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CD167a/DDR1/FITC熒光素標(biāo)記CD167a抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-CD169/Siglec-1/sialoadhesin/FITC熒光素標(biāo)記CD169抗體IgG規(guī)格:0.2ml 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2圖片*Anti-SCG3/SgIII分泌粒蛋白3抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-SCN1ASCN1A抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-SCN2ASCN2A抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-SCN9A/NAV1.7電壓開啟的鈉離子通道SCN9A抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-SCP2/NLTP固醇攜帶蛋白2抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-SCP3聯(lián)會(huì)復(fù)合體蛋白3抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-SCYLV甘蔗SCYLV抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-SDF-1/CXCL12基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1抗體規(guī)格:0.1ml *Anti-CXCL14CXC趨化因子14抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-Phospho-AuroraB(Thr232)/AuroraC(Thr198)磷酸化有絲分裂激酶B/C抗體規(guī)格:0.1ml 冷凍保存細(xì)胞之方法: 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |