人肺癌細胞株；MSTO-211H圖片

細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）人肺癌細胞株；MSTO-211H圖片準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
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產品描述：
細胞名稱 人肺癌細胞株；MSTO-211H圖片
形態特性成纖維細胞樣

生長特性貼壁生長

特征特性MSTO-211H細胞株是1985年從一位肺二相間皮瘤患者的胸水中建株的。這個病人接受過多種藥物聯合前期化療。MSTO-211H細胞具有高親和力的EGF結合位點，并表達神經元特異性烯醇酶(NSE)及人絨毛膜促性腺激素(HCG)的α與β亞基。未檢測到左旋多巴胺脫羧酶(DDC)，邦巴辛與神經tensin。細胞過表達c-myc原癌基因，并沒有觀察到基因重排或擴增。V-src,v-abl,v-erbB,c-raf1,Ha-ras,Ki-ras,和N-ras的表達呈陽性。未檢測到N-m

培養條件RPMI1640(w/oHepes)優質胎牛血清，10%

傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。

傳代情況P(21+5)

凍存條件*培養基+8%DMSO

支原體檢測陰性

STR

同工酶

染色體

注意事項：
?1.一般客戶拿到人肺癌細胞株；MSTO-211H圖片后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養液吸出，留下10ml培養液繼續培養；超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題，不予以重發的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態不好，不重發；
（3）非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發；
（4）細胞狀態不好，未提供細胞培養前3天照片的，不重發；
（5）細胞培養時經其它處理的，不重發；
（6）細胞收到2天內，未告知，不重發；
（7）視具體情況而定。
*Anti-CCR-10/FITC熒光素標記細胞表面趨化因子受體10抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CCRK/FITC熒光素標記細胞周期相關激酶抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CD2/FITC熒光素標記CD2抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CD2AP/FITC熒光素標記白細胞分化抗原CD2AP抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-SLAMF9/CD2F-10/FITC熒光素標記CD2F-10抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-SLAMF9/CD2F-10/FITC熒光素標記CD2F-10抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CD3/FITC熒光素標記CD3蛋白抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CD3/RBITC紅色熒光素羅丹明標記CD3抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CD3/PE熒光素PE標記CD3抗體IgG規格：0.2ml

*Anti-CD4/FITC熒光素標記CD4蛋白抗體IgG規格：0.2ml
人肺癌細胞株；MSTO-211H圖片*Anti-PSAP/PAP(human)前列腺酸性磷酸酶抗體(人)規格：0.1ml

*Anti-PSCA前列腺干細胞抗原抗體規格：0.1ml

*Anti-PSD93突觸后密度蛋白93抗體規格：0.2ml

*Anti-Phospho-PSD93(Tyr340)磷酸化突觸后密度蛋白93抗體規格：0.1ml

*Anti-PSD95突觸后密度蛋白95抗體規格：0.1ml

*Anti-Phospho-PSD95(Tyr236/Tyr240)磷酸化突觸后密度蛋白95抗體規格：0.1ml

*Anti-PSGL-1/CD162P選擇素糖蛋白配體1抗體規格：0.2ml

*Anti-PSMD9蛋白酶調解因子9規格：0.2ml

*Anti-LMP2低分子質量蛋白2抗體規格：0.2ml

*Anti-Proteasome20SLMP7低分子質量蛋白7抗體規格：0.2ml
冷凍保存細胞之方法：
人肺癌細胞株；MSTO-211H圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。