細胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)人前列腺癌細胞;LNCaP clone FGC價格準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,人前列腺癌細胞;LNCaP clone FGC價格貨期短,價格優(yōu),售后齊全。點擊進入了解更多腫瘤細胞。 產(chǎn)品描述: 細胞名稱 人前列腺癌細胞;LNCaP clone FGC價格 形態(tài)特性上皮細胞 生長特性貼壁生長 特征特性人前列腺癌細胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結(jié)針刺活檢中分離,該患者經(jīng)確診為前列腺癌轉(zhuǎn)移。這株細胞對5-α-二氫睪酮(生長調(diào)節(jié)子和酸性磷酸脂酶產(chǎn)物)有響應(yīng)。這株細胞并不 成*的單層,而是 成集落,在傳代時可以用滴管反復(fù)吹吸打碎。它們僅僅輕輕地吸附在基底上,不 成匯合,很快使培養(yǎng)基變酸。生長很慢。傳代后48小時內(nèi)不應(yīng)擾動。當培養(yǎng)瓶封包后,多數(shù)細胞從培養(yǎng)瓶底分離,懸浮在培養(yǎng)基中。收到后,在通常培養(yǎng)單層細胞的條件下培養(yǎng)24到48小時,以合細胞再貼壁。 培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10% 傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 傳代情況P(18+5) 凍存條件*培養(yǎng)基+8%DMSO 支原體檢測陰性 STRAmelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:10,12;D16S539:11;D18S51:11,12;D19S433:13.2,15;D21S11:29,32.2;D2S1338:16;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:9.1,10.3;D8S1179:12,14;FGA:19,20;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:16,18 同工酶 染色體
注意事項: ?1.一般客戶拿到人前列腺癌細胞;LNCaP clone FGC價格后,應(yīng)該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。 細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 *Anti-Caspase-9/FITC熒光素標記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Phospho-Caspase-9(Pry153)/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Caspase-10/FITC熒光素標記半胱胺酸蛋白酶-10抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Caspase-12(hunman)/FITC熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體(人)IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Caspase-12/FITC熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Caspase-13/FITC熒光素標記半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Phospho-Caspase-9(Thr125)/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Alpha-Catenin/Alpha-cats/FITC熒光素標記α-連環(huán)蛋白抗體(α-α鏈接素)IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Beta-catenin/Beta-cats/FITC熒光素標記β-連環(huán)蛋白抗體IgG規(guī)格:0.2ml *Anti-Phospho-Beta-Catenin(Ser33/37)/FITC熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化β連環(huán)素蛋白抗體IgG規(guī)格:0.2ml 人前列腺癌細胞;LNCaP clone FGC價格*Anti-PLGF胎盤生長因子抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-PLK1/STPK13絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-Phospho-PLK1(Thr210)磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體規(guī)格:0.1ml *Anti-Phospho-PLK1(Ser137)磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體規(guī)格:0.1ml *Anti-PMP22外周髓鞘蛋白-22抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-PMS2腫瘤錯配修復(fù)基因PMS2抗體規(guī)格:0.1ml *Anti-PNAT/NAT2N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶2抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-PNK1/PNKP多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-Phospho-PNK1(Ser114/Thr118)磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體規(guī)格:0.1ml *Anti-Podoplanin/gp36平足蛋白抗體規(guī)格:0.2ml 冷凍保存細胞之方法: 人前列腺癌細胞;LNCaP clone FGC價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |