細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人髓樣甲狀腺腫瘤細胞;TT培養準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,人髓樣甲狀腺腫瘤細胞;TT培養貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多腫瘤細胞。 產品描述: 細胞名稱 人髓樣甲狀腺腫瘤細胞;TT培養 形態特性上皮細胞 生長特性貼壁生長 特征特性TT細胞由77歲女性甲狀腺髓質癌患者的穿刺活檢樣本中建立。TT細胞持續產生高水平的降血鈣素和CEA。在更換培養基后24小時和72小時在培養基中檢測到的免疫活性的降血鈣素濃度分別為3900pg/百萬細胞和7700pg/百萬細胞。72小時后CEA積累濃度超過27ng/百萬細胞。 培養條件F12K優質胎牛血清,10% 傳代方法消化5-10分鐘。1:2。一周后可再傳。 傳代情況P(31+5) 凍存條件*培養基+8%DMSO 支原體檢測陰性 STR 同工酶 染色體
注意事項: ?1.一般客戶拿到人髓樣甲狀腺腫瘤細胞;TT培養后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 *Anti-APEX1/Ref-1/FITC熒光素標記氧化還原因子1抗體IgG規格:0.2ml *cx規格:0.2ml *Anti-API5/AAC11/FITC熒光素標記凋亡抑制因子5抗體IgG規格:0.2ml *Anti-APNG/MPG/FITC熒光素標記N-甲基嘌呤DNA糖基化酶IgG規格:0.2ml *Anti-apoA1/FITC熒光素標記載脂蛋白A1抗體IgG規格:0.2ml *Anti-ApoB/FITC熒光素標記載脂蛋白B抗體IgG規格:0.2ml *Anti-apo-D/FITC熒光素標記載脂蛋白D抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Apo-E/FITC熒光素標記載脂蛋白E抗體IgG規格:0.2ml *Anti-ApoH/FITC熒光素標記載脂蛋白H抗體IgG規格:0.2ml *Anti-Apollon/FITC熒光素標記Apollon凋亡抑制蛋白抗體IgG規格:0.2ml 人髓樣甲狀腺腫瘤細胞;TT培養*Anti-OPCML阿片樣物質結合蛋白/細胞粘附分子樣蛋白抗體規格:0.2ml *Anti-OPG骨保護蛋白/護骨素抗體規格:0.1ml *Anti-RANK核轉錄因子NF-κB受體抗體規格:0.2ml *Anti-OPGL/ODF骨保護蛋白配體抗體(破骨細胞分化因子)規格:0.1ml *Anti-OPN骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)人規格:0.1ml *Anti-OPN骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)規格:0.1ml *Anti-Orexin-A增食欲素-A/欲激素A規格:0.1ml *Anti-Osterix成骨相關轉錄因子抗體規格:0.1ml *Anti-Os05g0477200protein水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體規格:1ml *Anti-oxytocinreceptor催產素受體(縮宮素受體)抗體規格:0.1ml 冷凍保存細胞之方法: 人髓樣甲狀腺腫瘤細胞;TT培養冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |