人膽囊癌細胞；GBC-SD GBCSD培養(yǎng)

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產(chǎn)品描述：
細胞名稱 人膽囊癌細胞；GBC-SD [GBCSD]培養(yǎng)
形態(tài)特性上皮細胞樣

生長特性貼壁生長

特征特性GBC-SD細胞株是王展明等2000年從一位61歲的男性低分化膽囊癌患者中建立的。細胞的

狀有多邊

、紡錘

和正方

。分泌CEA和CA19-9。倍增時間大約為21.4小時。可移植到裸鼠。生成的腫瘤與原發(fā)腫瘤相似。

培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法消化3-5分鐘。1:2。5天長滿。

傳代情況PN

凍存條件*培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測陰性

STRAmelogenin:X,Y；CSF1PO:13；D13S317:8,12；D16S539:11,13；D18S51:14,21；D19S433:14,15.2；D21S11:30,31；D2S1338:17,24；D3S1358:17；D5S818:11；D7S820:11,12；D8S1179:10,12；FGA:23；TH01:7,10；TPOX:11；vWA:16,17

同工酶

染色體
冷凍保存細胞之方法：
人膽囊癌細胞；GBC-SD [GBCSD]培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）人膽囊癌細胞；GBC-SD [GBCSD]培養(yǎng)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
*smActinin-Alpha(MouseskeletalmuscleActinin-Alpha)ELISAKit小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α規(guī)格：48T

*MYS(MouseMyosin)ELISAKit小鼠肌球蛋白規(guī)格：48T

*MHCI/H-2I(MousemajorhistocompatibilitycomplexI)ELISAKit小鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類規(guī)格：48T

*GATA4MouseGATAbindingprotein4)ELISAKit小鼠GATA結合蛋白4規(guī)格：48T

*IP-10/CXCL10(Mouseinterferon-inducibleprotein10)ELISAKit小鼠干擾素誘導蛋白10規(guī)格：48T

*ENA-78/CXCL5(MouseEpithelialneutrophilactivatingpeptide78)ELISAKit小鼠上皮中性粒細胞活化肽78規(guī)格：48T

*OLAb(Mouseoxidizedlowdensitylipoproteinantibody)ELISAKIT小鼠氧化低密度脂蛋白抗體規(guī)格：48T

*ASMA(MouseAnti-SmoothMuscleAntibody)ELISAKit小鼠抗平滑肌抗體規(guī)格：48T

*M30(MouseEmbryonicStemMESPU30)ELISAKit小鼠胚胎干細胞系MESPU30規(guī)格：48T

*NF-κBp65(Mousenuclearfactor-κBp65)ELISAKit小鼠核因子κB亞基p65親和肽規(guī)格：48T
人膽囊癌細胞；GBC-SD [GBCSD]培養(yǎng)*Anti-phospho-JAK2(Tyr221)磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Jak3蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Phospho-Jak3(Tyr785)磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Phospho-Jak3(Tyr980/981)磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-JNK1/3氨基末端激酶1/3抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-JNK2氨基末端激酶2抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-JNK3/MAPK10氨基末端激酶3抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Jab1Jun激活區(qū)域-連接蛋白1抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-phospho-JNK1/2/3(Thr183/185)磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-JNK1/2/3氨基末端激酶1/2/3抗體規(guī)格：0.1ml
注意事項：
?1.一般客戶拿到人膽囊癌細胞；GBC-SD [GBCSD]培養(yǎng)后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。