人肺癌細胞；H1299培養(yǎng)

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產(chǎn)品描述：
細胞名稱 人肺癌細胞；H1299培養(yǎng)
形態(tài)特性上皮樣細胞

生長特性貼壁生長

特征特性這株細胞來源于一個淋巴結轉移。患者接受了初期放療。細胞均一性的部分缺失p53蛋白，并缺少p53蛋白表達。細胞可以合成0.1pmol/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃液釋放肽(GRP)。

培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質胎牛血清，10%

傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況

凍存條件基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測培養(yǎng)法（-）

STRAmelogenin:X；CSF1PO:12；D13S317:12；D16S539:12,13；D18S51:16；D21S11:32.2；D3S1358:17；D5S818:11；D7S820:10；D8S1179:10,13；FGA:20；PentaD:13；PentaE:11；TH01:6,9.3；TPOX:8；vWA:16,18

同工酶

染色體

冷凍保存細胞之方法：
人肺癌細胞；H1299培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）人肺癌細胞；H1299培養(yǎng)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
E2*牛雌二醇規(guī)格48T/96T

acetone*牛丙酮檢測規(guī)格48T/96T

IL-2R*牛白介素2受體規(guī)格48T/96T

βOHB*牛β羥丁酸規(guī)格48T/96T

α1-AGP*牛α1酸性糖蛋白規(guī)格48T/96T

CRP*牛C反應蛋白規(guī)格48T/96T

MHC*綿羊主要組織相容性復合體規(guī)格48T/96T

C3bR*綿羊補體片段3b受體規(guī)格48T/96T

IL-2R*綿羊白介素2受體規(guī)格48T/96T

IL-2*綿羊白介素2規(guī)格48T/96T
人肺癌細胞；H1299培養(yǎng)*Anti-Phospho-CyclinB1(Ser147)磷酸化周期素B1抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Phospho-CyclinB1(Ser133)磷酸化周期素B1抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-CyclinC周期素C抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-CyclinD1周期素D1抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Phospho-CyclinD1(Thr286)磷酸化cyclinD1抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-CyclinD2周期素D2抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-CyclinD3周期素D3抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-CyclinE周期素E抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-phospho-CyclinE(Thr395)磷酸化周期素E抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-phospho-CyclinE(Thr62)磷酸化周期素E抗體規(guī)格：0.1ml
注意事項：
?1.一般客戶拿到人肺癌細胞；H1299培養(yǎng)后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。