細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人胃癌細胞;MKN-28圖片準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,人胃癌細胞;MKN-28圖片貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多腫瘤細胞。 產品描述: 細胞名稱 人胃癌細胞;MKN-28圖片 形態特性上皮樣 生長特性貼壁生長 特征特性 培養條件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS 傳代方法1:2傳代 傳代情況 凍存條件基礎培養基+8%DMSO+34%FBS 支原體檢測培養法(-) STR 同工酶 染色體
注意事項: ?1.一般客戶拿到人胃癌細胞;MKN-28圖片后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 OTF2B*人八聚體轉錄因子規格48T/96T OTF2A*人八聚體轉錄因子規格48T/96T ECHOIgM*人艾柯病毒IgM規格48T/96T CEF*人癌胚鐵蛋白規格48T/96T CEA/CD66*人癌胚抗原規格48T/96T 人癌基因蛋白質p190/bcr-ablELISAKit,48T/96T*人癌基因蛋白質p190/bcr-ablELISAKit,48T/96T規格48T/96T OrexinA*人阿立新A規格48T/96T AGPs*人阿拉伯半乳糖蛋白規格48T/96T POMC*人阿黑皮素原規格48T/96T POMC*人阿黑皮素原規格48T/96T 人胃癌細胞;MKN-28圖片*Anti-CD45CD45單克隆抗體規格:0.1ml *Anti-CD46/MCP膜輔蛋白抗體規格:0.2ml *Anti-CD46/MCP膜輔蛋白抗體規格:0.2ml *Anti-CD45ROCD45RO抗規格:0.1ml *Anti-CD48/SLAMF2CD48抗體規格:0.2ml *Anti-CD58/LFA-3淋巴細胞功能相關抗原-3抗體規格:0.2ml *Anti-Integrinalpha2/CD49b整合素α2抗體規格:0.1ml *Anti-CD5CD5抗體規格:0.2ml *Anti-CD5L/Api6CD5L抗體規格:0.2ml *Anti-CD6/TP120CD6抗體規格:0.2ml 冷凍保存細胞之方法: 人胃癌細胞;MKN-28圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |