人肺鱗癌細(xì)胞；LTEP-s培養(yǎng)

冷凍保存細(xì)胞之方法：
人肺鱗癌細(xì)胞；LTEP-s培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品描述：
細(xì)胞名稱 人肺鱗癌細(xì)胞；LTEP-s培養(yǎng)
形態(tài)特性多邊

上皮細(xì)胞樣

生長特性貼壁生長

特征特性1978年建系，人肺低分化鱗癌，原代細(xì)胞胰酶消化，3日細(xì)胞開始生長，組織塊法2周開始生長，*傳代23日；免疫缺陷小鼠體內(nèi)可以

成實體瘤。STR檢測發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞與人肺癌細(xì)胞LTEP-a1為同一遺傳背景，還有存在細(xì)胞間的交叉污染。

培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法

傳代情況P56

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測培養(yǎng)法（-）

STRAmelogenin：X，Y；CSF1PO：11，12；D13S317：11；D16S539：8，9；D18S51：14；D19S433：13；D21S11：32.2，33.2；D2S1338：20，25；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：10，12；D8S1179：15，17；FGA：24；TH01：7；TPOX：8；vWA：14，18；

同工酶

染色體84~95

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）人肺鱗癌細(xì)胞；LTEP-s培養(yǎng)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
?1.一般客戶拿到人肺鱗癌細(xì)胞；LTEP-s培養(yǎng)后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
LDL*人低密度脂蛋白規(guī)格48T/96T

LMP7/PSMB9*人低分子質(zhì)量蛋白7規(guī)格48T/96T

LMWH*人低分子肝素規(guī)格48T/96T

NGF*人的神經(jīng)生長因子規(guī)格48T/96T

人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISAKit，48T/96T*人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISAKit，48T/96T規(guī)格48T/96T

ConA*人刀豆素A規(guī)格48T/96T

PLP*人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體規(guī)格48T/96T

PR3-ANCA*人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體規(guī)格48T/96T

PPP1R1A*人蛋白磷酸酶1調(diào)控/抑制因子亞基1A規(guī)格48T/96T

PP*人蛋白磷酸酶規(guī)格48T/96T
人肺鱗癌細(xì)胞；LTEP-s培養(yǎng)*Anti-Caspase-1(actived)天冬氨酸-胱氨酸特異性蛋白酶家族抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Caspase-10半胱胺酸蛋白酶-10抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Caspase-12半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Caspase-12半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-Caspase-13/4半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Caspase-3(Active)活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體規(guī)格：0.1ml

*Anti-caspase-3p12subunit活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-procaspase3半胱天冬酶-3酶原抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Caspase4半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體規(guī)格：0.2ml

*Anti-Caspase-6(CT)半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體（C端）規(guī)格：0.1ml
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