大鼠心肌組織提取物培養(yǎng)

大鼠心肌組織提取物【Rat Heart: Normal Heart Derivatives】

心肌分布在心和鄰近心的大血管根部。心肌主要由心肌纖維構(gòu)成，期間有結(jié)締組織、心血管和神經(jīng)。心肌收縮有自主節(jié)律性，緩慢而持久。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠心肌組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

Cholesterol 膽固醇   g 2-(Cyanomethyl)benzimidazole441482-甲基苯并咪唑

CMP 胞苷 5’-單磷酸   0mg2-(Chloromethyl)-methylquinazoline91132

Congo red 剛果紅   5g2-(7-Methoxy-naphthyl)ethylamine hydrochloride1395257

Coomassie brilliant blue G 考馬斯亮藍(lán)G   5g2-(5-Chloro-phenoxyphenyl)acetic acid95

Coomassie brilliant blue R 考馬斯亮藍(lán)R   5g2-(4-Chloro-hydroxy-butynyl)-(1,3-pentadiynyl)thiophene26
Convallatoxin  中文名：鈴蘭毒苷  分子式：C29H42O10  度：98.0%  兔生成素2elisa試劑盒   兔生成素2試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔生成素2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔生成素2試劑盒、兔生成素2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Cynanoside F  中文名：  分子式：C41H62O15  度：98.0%  兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1elisa試劑盒   兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒、兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Periplocoside F  中文名：  分子式：C63H104O23  度：98.0%  兔內(nèi)皮細(xì)胞生長因子elisa試劑盒   兔內(nèi)皮細(xì)胞生長因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔內(nèi)皮細(xì)胞生長因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔內(nèi)皮細(xì)胞生長因子試劑盒、兔內(nèi)皮細(xì)胞生長因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol  中文名：  分子式：C29H46O3  度：97.5%  兔緊張素Ⅱelisa試劑盒   兔緊張素Ⅱ試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔緊張素Ⅱ試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔緊張素Ⅱ試劑盒、兔緊張素Ⅱ elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Minisecolide C  中文名：  分子式：C28H34O7  度：%  兔生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒
奈比洛爾鹽酸鹽;奈必洛爾  Nebivolol hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)試劑盒 Human Hpt/HP ELISA KIT

奈必洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)  Nebivolol hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 人結(jié)核菌桿(TB)抗體(IgA)試劑盒 Human tuberculosis(TB)aibody(IgA)ELISA kit

核固紅  Nuclear fast red  質(zhì)量規(guī)格：BS 人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)試劑盒 Human tuberculosis aibody IgG,TB-Ab IgG ELISA Kit

胭脂紅  Carmine  質(zhì)量規(guī)格：BS,用于生物學(xué)染色 人結(jié)核菌桿抗體IgM(TB-Ab IgM)試劑盒 Human tuberculosis aibody IgM,TB-Ab IgM ELISA Kit

酚紅  Bromophenol red  質(zhì)量規(guī)格：AR 人結(jié)核菌素(Tuberculin)試劑盒 Human Tuberculin ELISA Kit

麗春紅2R(BS)  Ponceau 2R  質(zhì)量規(guī)格：BS 人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)試劑盒 Human CF ELISA Kit

孟加拉玫瑰紅,酸性紅94  Rose bengal  質(zhì)量規(guī)格：AR 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanUreaplasmaurealyticumaibody,UU-AbELISAKit 96T/48T

偶氮熒光桃紅,酸性紅1  Azophloxine  質(zhì)量規(guī)格：BS 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒 Human ureaplasma urealyticum(UU)aibody ELISA kit

曙紅Y,醇溶劑紅 43  Eosin Y ,alcohol solution  質(zhì)量規(guī)格：AR 人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 10,ADAM10 ELISA Kit

曙紅B  Eosin B  質(zhì)量規(guī)格：BS 人解整合素樣金屬蛋白酶12(ADAM12)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 12,ADAM12 ELISA Kit
大鼠心肌組織提取物培養(yǎng)兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2,2-Diphenylglycine  中文名：  分子式：C14H13NO2  度：98.0%

兔組織因子elisa試劑盒   兔組織因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔組織因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔組織因子試劑盒、兔組織因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Allopurinol  315-30-0  中文名：別嘌醇  分子式：C5H4N4O  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔組織因子   英文名稱：   Rabbit Tissue Factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TF  Allitol  488-44-8  中文名：蒜糖醇  分子式：C6H14O6  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔組織金屬蛋白酶抑制因子1   英文名稱：   Rabbit Tissue Inhibitor of Metalloproteinases 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TIMP-1  Allitol  488-44-8  中文名：蒜糖醇  分子式：C6H14O6 

組織因子(TF)ELISA試劑盒     Allyl cinnamate  1866-31-5  中文名：肉桂酸烯丙酯  分子式：C12H12O2

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。