產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 | 犬新孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒價格 | Neospora caninum | EY-P7007 |
實時熒光定量PCR: 實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的: 1)Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性*,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。 2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。 外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量準確,重現性的定量方法,已得到*的*,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
熒光化學物質: 實時熒光定量PCR所使用的熒光物質可分為兩種:熒光探針和熒光染料。現將其原理簡述如下: 1. TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析,又可分析基因突變(SNP),有望成為基因診斷和個體化用藥分析的技術平臺。 2. SYBR熒光染料:在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合,因此可以通過溶解曲線,確定PCR反應是否特異。 3. 分子信標:是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發夾結構的莖環雙標記寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補配對,導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近,不會產生熒光。PCR產物生成后,退火過程中,分子信標中間部分與特定DNA序列配對,熒光基因與淬滅基因分離產生熒光 幾種傳統熒光定量PCR方法簡介: 1)內參照法: 在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。 2)競爭法: 選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。 3)PCR-ELISA法: 利用或生物素等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,終酶使底物顯色。常規的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。 組蛋白A(小牛胸腺)5克 小鼠Ⅻ型膠原(COL12)ELISA試劑盒 ,英文名: COL12 ELISA Kit Bialaphos 10mg/25mg/100mg USA 人相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA檢測試劑盒HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 96T/48T 鎘黃,英文名或英文縮寫:Cadmium sulfide,級別:AR,99.5%,規格:10克 大鼠肺炎病毒抗體(PV-Ab)免疫試劑盒 Rat Pneumonia Virus Aibody,PV-Ab Elisa kit 鱗鉬醋銨 cMMONIUM PHOSPHOMOLYBDcTq HYDRcTq 2473-94-3 CLIAKitforu-T3ELISAKit大鼠高敏*狀腺原氨酸規格:48T/96T 芐氧羰基甘酸,英文名或英文縮寫:CBZ-L-Gly,級別:特純,99%,規格:100克 擬南芥葉片原生質細胞分離試劑盒5次 水合三錄乙醛,英文名或英文縮寫:TCA,級別:BR,78.8%,規格:25毫升 ELISAKitLMWH豬低分子肝素規格:48T/96T MicrobialContentTestagar 500g原裝 BD 255320 Humandiamineoxidase,DAOELISAKit人氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規格:96T/48T 3-metxoxypxenol3-羥基1克CP,99% 人酸性酶(ACP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 三錄本 Bqnzotrichloridq 1998-7-7 豬17羥孕酮(17-OHP)免疫試劑盒 Pig 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit ESBO環氧豆油100克AR,90% 高致病性豬藍耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T 聚山梨酯80培養基(真菌)shēng huà shì jì容量:500毫升 魚類主要組織相容性復合體(MHC)ELISA檢測試劑盒Fishmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISAKit 96T/48T (+)-Cellobiose 犬脂多糖/內毒素(LPS)免疫試劑盒 Canine Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit 瓊脂糖凝膠6FF1克2~8℃ 英文名稱MouseBAFF-RELISAKit小鼠B細胞活化因子受體(BAFF-R)規格:96T/48T 順-十輕-1-酚 CIS-DqCcxy7-NcPHTHOL 99 36129-47-4 冰凍切片組織線粒體復合物III蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次 1,2,3,4-環丁四羧二酐 Cyclobutcnq-1,2,3,4-tqtrcccrboxylic dicnhydridq 4412-87-6 RatEsiol,E3ELISA試劑盒大鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒規格:96T/48T 犬新孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒價格半乳糖氧化酶,英文名或英文縮寫:Galactose oxidase,級別:精制級,1000-3000u/mg,規格:25克 HumanFreeThyroxine,FT4ELISAKit人游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒規格:96T/48T 姆沙伯 101Chromosorb 101 人細胞分裂周期基因(CDC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 RAPIDWESTERNSTARTET快速western啟動試劑盒RTsigma 豬骨形成蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒 Pig Bone Morphogenetic Protein 2,BMP-2 ELISA Kit 酸性橙12 Acid Orange 12,70% 1934-20-9 5G 通用試劑 Humanmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAkit 人單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 減性品紅;鹽基品紅;減性新品紅;玫瑰本安言醋鹽 Fuchsin bcsic;Mcgqntc;Bcsic Mcgqntc;Bcsic rubin;Bcsic violqt 14;C.I. 42510 269-61-9 HumanNandrolonePhenylpropionate,NPELISA試劑盒人苯諾龍/苯去甲睪同(NP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 熒光定量PCR服務: 公司推出,該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務,全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀器。 1、熒光定量PCR服務要求: (01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。 (02)請提供已知的全長基因序列。 (03)請提供盡可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等 2、熒光定量PCR操作程序 (01)引物(探針)設計與合成。 (02)提取DNA/RNA,樣本逆轉錄成cDNA。 (03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結果分析。 (04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料。 3、熒光定量PCR的收費標準: 我公司根據客戶的樣品數量進行不同的收費標準 |