小鼠神經星形膠質細胞提取物【Mouse Brain: Normal Nerve AstrocytesDerivatives】 小鼠神經星形膠質細胞提取物是從小鼠原代神經星形膠質細胞提取的,小鼠原代神經星形膠質細胞從正常小鼠腦組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產品名稱 | 小鼠神經星形膠質細胞提取物說明書 | 英文名稱 | Mouse Brain: Normal Nerve AstrocytesDerivatives | 貨號 | EYX99190 |
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 巨細胞病毒核酸定量檢測試劑盒(PCR熒光探針法)24人份/盒Tegafur1723替加氟 輪狀病毒核酸檢測試劑盒(PCR熒光探針法)24人份/盒Tebipenem pivoxil1617154泰比培南酯 腸道腺病毒核酸檢測試劑盒(PCR熒光探針法)24人份/盒Tazobactam acid897864他唑巴坦酸 甲型流感病毒核酸檢測試劑盒(PCR熒光探針法)24人份/盒Taxoquinone217641 核酸提取試劑(全血)人份/盒、0人份/盒、48人份/盒、96人份/盒Taxilluside A16619146 Humanpituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit人垂體腺苷酸環化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 19-Nortestosterone acetate 中文名:19-去甲睪酮乙酸鹽 分子式:C20H28O3 Humanpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 18-Hydroxytritriacontan-16-one 97191-42-9 中文名: 分子式:C33H66O2 HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit人0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒規格:96T/48T 17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one 中文名:17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮 分子式:C26H30O3 HumanPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit人0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規格:96T/48T 17α-Thevebioside 114613-59-1 中文名: 分子式:C36H56O13 HumanPhosphorylatedacetylCoA,PaCoAELISAKit人0酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 17α-Estradiol 中文名:17α-雌二醇 分子式:C18H24O2 物質P(1-9) Substance P (1-9) 質量規格:>95%,BR 小鼠細胞周期素D3(CCND3)ELISA試劑盒 ,英文名: CCND3 ELISA Kit 物質P(7-11) Substance P (7-11) 質量規格:>95%,BR 小鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒 ,英文名: Cyclin-D3 ELISA Kit TA-0910,他替瑞林 TA-0910, taltirelin 質量規格:>95%,BR 小鼠夏科雷登氏結晶蛋白(CLC)ELISA試劑盒 ,英文名: CLC ELISA Kit 促甲狀腺激素釋放激素,游離酸 TRH, Free Acid 質量規格:>95%,BR 小鼠纖連蛋白(FN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 尿皮質激素Ⅲ,小鼠 Urocortin III, mouse 質量規格:>95%,BR 小鼠纖連蛋白(FN)ELISA檢測試劑盒MouseFibronectin,FNELISAKit 96T/48T 纈絡肽(VQY),豬 Valosin Peptide (VQY),porcine 質量規格:>95%,BR 小鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒 ,英文名: FN ELISA Kit 血管活性腸肽 Vasoactive Intestinal peptide 質量規格:>95%,BR 小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Z-Ala-Ala-Leu-pNA Z-Ala-Ala-Leu-pNA 質量規格:>95%,BR 小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA檢測試劑盒Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 96T/48T 三亞甲基碳酸酯 TMC 質量規格: 度≥99% 小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒 ,英文名: PAP ELISA Kit 碳酸錳(>98%,BR) Manganese (II) carbonate 質量規格:>98%,BR 小鼠纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1)ELISA試劑盒 ,英文名: PAI-1 ELISA Kit 小鼠神經星形膠質細胞提取物說明書其它醌類 People leils binding type AFP / AFP varia 2 (AFP-L2) ELISA kit E 人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)ELISA試劑盒E 3,4-Didehydrosapriparaquione 142763-37-9 中文名: 分子式:C20H24O3 Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 人多球蛋白受體(poly-IgR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 Royleanone 6812-87-9 中文名: 分子式:C20H28O3 Humandynorphin,DynELISA試劑盒人強啡肽(Dyn)ELISA試劑盒規格:96T/48T Salvisyrianone 250691-57-7 中文名: 分子式:C20H24O3 組織P38a激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次 Dihydroisotanshinone I 20958-18-3 中文名: 分子式:C18H14O3 Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒規格:96T/48T |