小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞提取物說明書

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞提取物【Mouse Brain: Normal Nerve AstrocytesDerivatives】

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞提取物是從小鼠原代神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞提取的，小鼠原代神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞從正常小鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

巨細(xì)胞病毒核酸定量檢測試劑盒（PCR熒光探針法）24人份/盒Tegafur1723替加氟

輪狀病毒核酸檢測試劑盒（PCR熒光探針法）24人份/盒Tebipenem pivoxil1617154泰比培南酯

腸道腺病毒核酸檢測試劑盒（PCR熒光探針法）24人份/盒Tazobactam acid897864他唑巴坦酸

甲型流感病毒核酸檢測試劑盒（PCR熒光探針法）24人份/盒Taxoquinone217641

核酸提取試劑（全血）人份/盒、0人份/盒、48人份/盒、96人份/盒Taxilluside A16619146
Humanpituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  19-Nortestosterone acetate  中文名：19-去甲睪酮乙酸鹽  分子式：C20H28O3 

Humanpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  18-Hydroxytritriacontan-16-one  97191-42-9  中文名：  分子式：C33H66O2 

HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit人0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one  中文名：17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮  分子式：C26H30O3 

HumanPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit人0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17α-Thevebioside  114613-59-1  中文名：  分子式：C36H56O13 

HumanPhosphorylatedacetylCoA,PaCoAELISAKit人0酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17α-Estradiol  中文名：17α-雌二醇  分子式：C18H24O2
物質(zhì)P（1-9）  Substance P (1-9)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠細(xì)胞周期素D3(CCND3)ELISA試劑盒 ，英文名： CCND3 ELISA Kit

物質(zhì)P（7-11）  Substance P (7-11)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒 ，英文名： Cyclin-D3 ELISA Kit

TA-0910，他替瑞林  TA-0910, taltirelin  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠夏科雷登氏結(jié)晶蛋白(CLC)ELISA試劑盒 ，英文名： CLC ELISA Kit

促甲狀腺激素釋放激素，游離酸  TRH, Free Acid  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠纖連蛋白(FN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

尿皮質(zhì)激素Ⅲ，小鼠  Urocortin III, mouse  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠纖連蛋白(FN)ELISA檢測試劑盒MouseFibronectin,FNELISAKit 96T/48T

纈絡(luò)肽（VQY），豬  Valosin Peptide (VQY),porcine  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒 ，英文名： FN ELISA Kit

血管活性腸肽  Vasoactive Intestinal peptide  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Z-Ala-Ala-Leu-pNA  Z-Ala-Ala-Leu-pNA  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測試劑盒Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 96T/48T

三亞甲基碳酸酯  TMC   質(zhì)量規(guī)格： 度≥99% 小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒 ，英文名： PAP ELISA Kit

碳酸錳(>98%,BR)  Manganese (II) carbonate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1)ELISA試劑盒 ，英文名： PAI-1 ELISA Kit
小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞提取物說明書其它醌類              People leils binding type AFP / AFP varia 2 (AFP-L2) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA試劑盒E

3,4-Didehydrosapriparaquione  142763-37-9  中文名：  分子式：C20H24O3    Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 人多球蛋白受體(poly-IgR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Royleanone  6812-87-9  中文名：  分子式：C20H28O3    Humandynorphin,DynELISA試劑盒人強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Salvisyrianone  250691-57-7  中文名：  分子式：C20H24O3    組織P38a激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Dihydroisotanshinone I  20958-18-3  中文名：  分子式：C18H14O3    Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T