冷凍保存細(xì)胞之方法: 人腎癌細(xì)胞;A498培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 產(chǎn)品描述: 細(xì)胞名稱 人腎癌細(xì)胞;A498培養(yǎng) 形態(tài)特性上皮樣 生長特性貼壁生長 特征特性該細(xì)胞系由AaronsonS建立,源自一位52歲患有腎癌的女性病人。 培養(yǎng)條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS;1%NEAA 傳代方法1:3~1:8傳代;每周2次換液。 傳代情況C5 凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測培養(yǎng)法(-) STRAmelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12;D16S539:26;D18S51:17;D19S433:18;D21S11:28,32;D2S1338:12;D3S1358:15;D5S818:11,13;D7S820:10,11;D8S1179:13,15;FGA:18,20;TH01:6,9.3;TPOX:8,10;vWA:8,11; 同工酶 染色體
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)人腎癌細(xì)胞;A498培養(yǎng)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 二.細(xì)胞處理: 1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 注意事項(xiàng): ?1.一般客戶拿到人腎癌細(xì)胞;A498培養(yǎng)后,應(yīng)該注意什么? 客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。 收到細(xì)胞時如無異常情況,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。 細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 Apl/APA*人抗磷脂抗體規(guī)格48T/96T TA*人抗磷壁酸抗體規(guī)格48T/96T TA*人抗磷壁酸抗體規(guī)格48T/96T ALG*人抗淋巴細(xì)胞球蛋白規(guī)格48T/96T ALA*人抗淋巴細(xì)胞抗體規(guī)格48T/96T ASO*人抗鏈球菌溶血素O/抗O規(guī)格48T/96T ADH/VP/AVP*人抗利尿激素/精氨酸加壓素規(guī)格48T/96T SCA*人抗類固醇細(xì)胞抗體規(guī)格48T/96T RANA*人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體規(guī)格48T/96T RANA*人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體規(guī)格48T/96T 人腎癌細(xì)胞;A498培養(yǎng)*Anti-AATF拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-ABCA1腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體規(guī)格:0.1ml *Anti-ABCD1/CCL22嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-ABCB5ATP結(jié)合蛋白家族5抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-ABCB6ATP結(jié)合蛋白家族6抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-ABCF1ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-ABCG1三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-ABCG2三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體規(guī)格:0.1ml *Anti-ABCG4ABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體規(guī)格:0.2ml *Anti-c-Abl非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體規(guī)格:0.1ml 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,人腎癌細(xì)胞;A498培養(yǎng)貨期短,價格優(yōu),售后齊全。點(diǎn)擊進(jìn)入了解更多腫瘤細(xì)胞。 |