產品名稱 | 人體角膜成纖維細胞提取物 | 英文名稱 | Human Eye: Normal Corneal Cells Derivatives | 貨號 | EYX99075 |
人體角膜成纖維細胞提取物【Human Eye: Normal Corneal Cells Derivatives】 人角膜成纖維細胞分離自正常人角膜結締組織,主要功能:(1)成纖維細胞是結締組織中見的一種細胞。(2)可在角膜創傷后修復組織。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 鼠源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測/盒Dronedarone hydrochloride1416253鹽酸決奈達隆 魚源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測/盒Dromostanolone propionate5212屈他雄酮酯 牦牛源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測/盒Drevogenin A1633 海貍鼠源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測/盒Dregeoside Ga1986656 兔源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測/盒Dregeoside Da1986655 N-Acetyl-5-hydroxytryptamine 中文名:N-乙酰基-5-羥基色胺 分子式:C12H14N2O2 度:99.0% 小鼠αN已酰基葡糖苷酶elisa試劑盒 小鼠αN已酰基葡糖苷酶試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠αN已酰基葡糖苷酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠αN已酰基葡糖苷酶試劑盒、小鼠αN已酰基葡糖苷酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone 中文名:2-氨基-2',5-二氯二苯酮 分子式:C13H9Cl2NO 度:99.0% 小鼠αL巖藻糖苷酶elisa試劑盒 小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒、小鼠αL巖藻糖苷酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 3-Allylrhodanine 中文名:3-烯丙基羅丹寧 分子式:C6H7NOS2 度:99.0% 小鼠αL艾杜糖苷酸酶elisa試劑盒 小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒、小鼠αL艾杜糖苷酸酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Nandrolone laurate 中文名:月桂酸諾龍 分子式:C30H48O3 度:98.0% 小鼠α半乳糖基抗體(Gal)ELISA試劑盒 Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate 中文名:雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯 分子式:C23H34O4 度:98.0% 小鼠αN已酰基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒 乙基betaD吡喃葡萄糖苷 HPLC≥98% 5mg RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA試劑盒大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒規格:96T/48T 乙酸(肉)桂酯 HPLC≥98% 5mg RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISAKit大鼠正常T細胞表達和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒規格:96T/48T 乙酸Delta香樹精酯 HPLC≥98% 5mg RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISA試劑盒大鼠正常T細胞表達和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒規格:96T/48T 乙酸茶酸酯 HPLC≥98% 5mg RaeninELISAKit大鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒規格:96T/48T 乙酸東莨菪素酯 HPLC≥98% 5mg RaeninELISA試劑盒大鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒規格:96T/48T 乙酸二聚松柏酯 HPLC≥98% 5mg raesistinELISAKit大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒規格:96T/48T 乙酸六棱菊亭酯 HPLC≥98% 5mg raesistinELISA試劑盒大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒規格:96T/48T 乙酸維生素E HPLC≥98% 20mg Raetinol-bindingprotein,RBPELISAKit大鼠視黃醇結合蛋白(RBP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 乙酰胺 HPLC≥98% 5mg Raetinol-bindingprotein,RBPELISA試劑盒大鼠視黃醇結合蛋白(RBP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 乙酰基異柏烯酸 HPLC≥98% 5mg Raetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit大鼠視黃醇結合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒規格:96T/48T 人體角膜成纖維細胞提取物Trazodone hydrochloride 中文名:鹽酸曲唑酮 分子式:C19H23Cl2N5O GuanidineHydrochloride 500g trans-4-Aminocyclohexanol 中文名: 分子式:C6H13NO 月桂酰基麥芽糖苷 1g Tranexamic acid 中文名:凝血酸 分子式:C8H15NO2 N-Dodecyl-β-Maltoside Torososide A 中文名: 分子式:C38H32O15 新霉素 5g Topiramate 中文名:托吡酯 分子式:C12H21NO8S NeomycinSulfate 25g 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 |