熒光定量PCR試劑盒技術(shù): 本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
參數(shù)規(guī)格: 產(chǎn)品名稱:槍狀肝吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒直銷 英文名稱:Dicrocoelium dentriticum 貨號(hào):EY-P6624 產(chǎn)品規(guī)格:50T 分類:熒光定量PCR試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 產(chǎn)品特點(diǎn): 本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。 產(chǎn)品特點(diǎn) 1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增; 2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘; 3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。 在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。 特異性熒光標(biāo)記: TaqMan法 TaqMan探針的特性: (1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等 (2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q) (3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開,發(fā)熒光 (4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針 相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量: 內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。 相對(duì)定量分析方法 : 2-ΔΔCt 前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi) 1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值: ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test) ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator) 2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值: ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator) 3、計(jì)算表達(dá)水平比率: 2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟: (1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線; (2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。 其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。 步驟(2)為:待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。 其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。 氧化發(fā)酵試驗(yàn)(OF)培養(yǎng)基25克 HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit 人骨特異性堿性酶B(ALP-B)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 666-52-4氘代-D6eetonE-D6 HumanCarcinoembryonicFerritin,CEFELISA試劑盒人癌胚鐵蛋白(CEF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 堿性嶙酸酶測(cè)試盒shēng huà shì jì容量:500支/包 重組腺病毒效價(jià)溶斑測(cè)定試劑盒20次 O-乙酰-L-絲酸鹽... O-Acetyl-L-serine hydrochloride 66638-22-0 100MG 通用試劑 HumanSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit人可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 肌醇;環(huán)六烷醇 Inositol;Mqso-Inositol;Cyclohqxitol;Mqct sugcr;Cyclohqxcnqhqxol;Hqxcxy7noxycyclohqxcnq;Mqsoinositq;PhcsqoMcnnitq 87-89-8 小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-2 ELISA Kit 肉桂醛shēng huà shì jì容量:100克 色酸羥化酶(TPH)ELISA試劑盒 ,英文名: TPH ELISA Kit 連四鹽肉糖基礎(chǔ)NA PorcineOrexinB,OX-BELISA試劑盒豬食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 亞甲基藍(lán)shēng huà shì jì容量:100克 Humanandrogeeceptor,ARELISA試劑盒人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 4--2- 4-Fluoro-2-nitroanisole,98% 445-83-0 5G 通用試劑 Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit人芳香烴受體(AhR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 錄亞鉑醋鉀 dipotcssium tqtrcchloroplctinctq 1002-99-7 人β酚(β-naphthol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 咔唑25克 ELISAKitPAF豬血小板活化因子規(guī)格:48T/96T 403-19-02-扶-4-硝基本酚2-Fluoro-4-nitnopxenol HumanEsogen-inducedproteinpS2ELISAKit人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 普通瓊脂斜面培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:1米 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2.5-二基1 2,5-Dimqthyl-1H-pyrrolq 62-84-3 豬促甲狀腺素釋放激素(H)免疫試劑盒 Porcine H ELISA KIT N,N'-四甲基二硫雙硫羰,英文名或英文縮寫:TMTD,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:100克 HumanGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit 人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 槍狀肝吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒直銷蛋白保護(hù)劑TYshēng huà shì jì容量:5克 冰凍切片免疫組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測(cè)試劑盒(無(wú)一抗和二抗)50次 D-Glucose-1-PhosphateNa2 250mg/1g/5g/25g原裝 Sigma G7000 RatAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA試劑盒大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硅酸鈉1克 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 姆沙伯 101 Chromosorb 101 Rat vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 大鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒 聚乙二醇 3350 Poly(ethylene glycol) 3,350 (PEG 3350) 25322-68-3 100G 通用試劑 Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 |