人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H2087圖片

細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H2087圖片準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
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產品描述：
細胞名稱 人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H2087圖片
形態特性上皮樣

生長特性懸浮生長，有少數細胞疏松貼壁

特征特性該細胞是1988年11月從一名69歲白人男性（60年煙齡）非小細胞性肺腺癌淋巴結轉移組織中分離得到的。

培養條件DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)0.02mg/ml胰島素＋0.01mg/ml轉鐵蛋白＋25nM＋50nM＋1ng/mlEGF＋0.01mM乙酰胺＋0.01mM磷酸乙醇胺＋100pM*腺原氨酸＋0.5%(w/v)牛血清白蛋白＋10mMHEPES＋0.5mM丙酮酸鈉＋2mML-谷氨酰胺。

傳代方法1:2~1:4傳代；每周換液2次。

傳代情況

凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測培養法（-）

STRAmelogenin：X；CSF1PO：12；D13S317：11；D16S539：9，11；D18S51：13,15,17；D19S433：13,14；D21S11：30,32.2；D2S1338：22,24；D3S1358：15,17；D5S818：11；D7S820：8,10；D8S1179：10,12；FGA：20；TH01：7,9；TPOX：11；vWA：17；

同工酶

染色體

注意事項：
?1.一般客戶拿到人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H2087圖片后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養液吸出，留下10ml培養液繼續培養；超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題，不予以重發的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態不好，不重發；
（3）非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發；
（4）細胞狀態不好，未提供細胞培養前3天照片的，不重發；
（5）細胞培養時經其它處理的，不重發；
（6）細胞收到2天內，未告知，不重發；
（7）視具體情況而定。
PF*人落葉型天皰瘡抗體規格48T/96T

HelicalPeptide*人螺旋肽規格48T/96T

RVAg*人輪狀病毒抗原規格48T/96T

OVAsIgG*人卵清蛋白特異性IgG規格48T/96T

OVAsIgE*人卵清蛋白特異性IgE規格48T/96T

人卵巢癌標志物CA125ELISAKit，48T/96T*人卵巢癌標志物CA125ELISAKit，48T/96T規格48T/96T

PEA*人綠膿桿菌外毒素A規格48T/96T

TrxR*人硫氧還蛋白還原酶規格48T/96T

Trx*人硫氧化還原蛋白規格48T/96T

MS*人硫酸褪黑色素規格48T/96T
人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H2087圖片Telomerase(TE)端粒酶（催化亞單位）（多肽抗原）0.5mgTelomerase(TE

內涎蛋白/內皮唾液酸蛋白抗原TEM1/CD248(Tumorendothelialmarker1precursor)內涎蛋白/內皮唾液酸蛋白抗原0.5mgTEM1/CD248(Tumorendothelialmarker1precursor

Tenascin固生蛋白抗原Tenascin固生蛋白抗原0.5mgTenascin固生蛋白抗原

Tetracycline/BSA四環素偶聯牛血清白蛋白Tetracycline/BSA四環素偶聯牛血清白蛋白2mgTetracycline/BSA四環素偶聯牛血清白蛋白

Tetracycline/OVA四環素偶聯雞卵白蛋白Tetracycline/OVA四環素偶聯雞卵白蛋白2mgTetracycline/OVA四環素偶聯雞卵白蛋白

凋亡相關蛋白TFAR19抗原TFAR19(TF-1cellapoptsis-relatedgene19)凋亡相關蛋白TFAR19抗原0.5mgTFAR19(TF-1cellapoptsis-relatedgene19

TFF3(trefoilfactor3)三葉肽因子3(多肽)0.5mgTFF3(trefoilfactor3

TFPI/LACI組織因子途徑抑制劑TFPI/LACI組織因子途徑抑制劑0.5mgTFPI/LACI組織因子途徑抑制劑
冷凍保存細胞之方法：
人非小細胞肺腺癌細胞；NCI-H2087圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。