人B淋巴細胞瘤細胞；RAMOS（RA.1）說明書

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產品描述：
細胞名稱 人B淋巴細胞瘤細胞；RAMOS(RA.1)說明書
形態特性淋巴母細胞樣；圓

生長特性懸浮生長

特征特性該細胞來源于母系Ramos；EBV陰性；表達IL-4受體和低親和性IgE受體（CD23）；每個細胞表面大約有1500個IL-4的結合位點；分泌IgM（lamdaL）；表達膜型和分泌型的免疫球蛋白。

培養條件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法1:3傳代；3~5天1次。

傳代情況C5

凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測培養法（-）

STRAmelogenin：X；CSF1PO：10，11；D13S317：13，14；D16S539：10，13；D18S51：15；D6S1043：13,15；D21S11：30；D2S1338：20,23；D3S1358：14，15；D5S818：7,12；D7S820：11；D8S1179：13,16；FGA：20，24；PentaE：21；vWA：15,16；

同工酶

染色體

冷凍保存細胞之方法：
人B淋巴細胞瘤細胞；RAMOS(RA.1)說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）人B淋巴細胞瘤細胞；RAMOS(RA.1)說明書準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
GLUT1*人葡萄糖轉運蛋白1規格48T/96T

GIP*人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽規格48T/96T

GOD*人葡萄糖氧化酶規格48T/96T

GKRP*人葡萄糖激酶調節蛋白規格48T/96T

GCK*人葡萄糖激酶規格48T/96T

GPI*人葡萄糖6磷酸異構酶規格48T/96T

SPA*人葡萄球菌蛋白A規格48T/96T

TetanusAb*人破傷風抗體規格48T/96T

ODF*人破骨細胞分化因子規格48T/96T

Prednisolone*人潑尼松龍規格48T/96T
人B淋巴細胞瘤細胞；RAMOS(RA.1)說明書抗子宮內膜抗原sFRP-4(Secretedfrizzled-relatedprotein4;Frizzledprotein,humanendometrium)抗子宮內膜抗原0.5mgsFRP-4(Secretedfrizzled-relatedprotein4;Frizzledprotein,humanendometrium

鈉-葡萄糖共轉運載體1抗原SGLT1(sodium-glucosecotransporter1)鈉-葡萄糖共轉運載體1抗原0.5mgSGLT1(sodium-glucosecotransporter1

蛋白抗原Shadow/SPRN(Shadowofprionproteinprecursor)新朊蛋白/朊蛋白相關蛋白/沙杜（Shadoo）蛋白抗原0.5mgShadow/SPRN(Shadowofprionproteinprecursor

shank1多肽抗原shank1(SH3andmultipleanleyrinrepeaddominsprotein1)shank1多肽抗原0.5mgshank1(SH3andmultipleanleyrinrepeaddominsprotein1

Shiga-liketoxinIIevariantsubunitA0139[Escherichiacoli0139]大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體（O139菌型）0.5mgShiga-liketoxinIIevariantsubunitA0139[Escherichiacoli0139]大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體（O139菌型

Shiga-liketoxinIIevariantsubunitA[Escherichiacoli0139]大腸桿菌志賀樣毒素菌體蛋白（O139菌型）0.5mgShiga-liketoxinIIevariantsubunitA[Escherichiacoli0139]大腸桿菌志賀樣毒素菌體蛋白（O139菌型

ShK(StichodactylahelianthusNeurotoxin)-(Gln9)海葵神經毒素（35肽）0.1mgShK(StichodactylahelianthusNeurotoxin

ShK(StichodactylahelianthusNeurotoxin)-(Gln11)海葵神經毒素（35肽）0.1mgShK(StichodactylahelianthusNeurotoxin
注意事項：
?1.一般客戶拿到人B淋巴細胞瘤細胞；RAMOS(RA.1)說明書后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養液吸出，留下10ml培養液繼續培養；超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題，不予以重發的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態不好，不重發；
（3）非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好，不重發；
（4）細胞狀態不好，未提供細胞培養前3天照片的，不重發；
（5）細胞培養時經其它處理的，不重發；
（6）細胞收到2天內，未告知，不重發；
（7）視具體情況而定。