冷凍保存細胞之方法: 表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 產品描述: 細胞名稱 表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET圖片 形態特性上皮樣;多角 生長特性貼壁生長 特征特性該細胞來源于293細胞,可以表達SV40T和EBNA1。 培養條件IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS 傳代方法1:6傳代;2天1次 傳代情況不詳 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測培養法(-) STRAmelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12;D16S539:9;D18S51:18;D19S433:18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19; 同工酶 染色體
細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET圖片準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 注意事項: ?1.一般客戶拿到表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET圖片后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 PK*人胰激肽原酶規格48T/96T GLP-1*人胰高血糖素樣肽1規格48T/96T GC*人胰高血糖素規格48T/96T PP*人胰多肽規格48T/96T Amylin*人胰淀素規格48T/96T PAMY*人胰淀粉酶規格48T/96T IA-2A*人胰島細胞抗原2抗體/蛋白酪氨酸磷酸酶抗體規格48T/96T ICA*人胰島細胞抗體規格48T/96T IAA*人胰島素自身抗體規格48T/96T PI*人胰島素原規格48T/96T 表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET圖片巨噬細胞炎性蛋白3α抗原MIP3Alpha/CCL20(Macrophageinflammatoryptotein3alpha)巨噬細胞炎性蛋白3α抗原0.5mgMIP3Alpha/CCL20(Macrophageinflammatoryptotein3alpha 巨噬細胞炎性蛋白19抗原MIP-3beta/ELC/CCL19(MacrophageInflammatoryProtein3Beta)巨噬細胞炎性蛋白19抗原0.5mgMIP-3beta/ELC/CCL19(MacrophageInflammatoryProtein3Beta 中期因子/肝素結合生長因子抗原MK(Midkine)中期因子/肝素結合生長因子抗原0.5mgMK(Midkine 絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗原MKK3(MAPKinaseKinase3)絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗原0.5mgMKK3(MAPKinaseKinase3 MLC/Myosinlightchain3peptide肌球蛋白輕鏈3抗原MLC/Myosinlightchain3peptide肌球蛋白輕鏈3抗原0.5mgMLC/Myosinlightchain3peptide肌球蛋白輕鏈3抗原 錯配修復蛋白1抗原MLH1(Mutlhomologlgene)錯配修復蛋白1抗原0.5mgMLH1(Mutlhomologlgene peptide胃動素多肽MLN(Motilin)peptide胃動素多肽0.5mgMLN(Motilin MMP-1基質金屬蛋白酶-1MMP-1基質金屬蛋白酶-10.5mgMMP-1基質金屬蛋白酶-1 我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET圖片貨期短,價格優,售后齊全。點擊進入了解更多轉化細胞。 |