人胚腎細胞；293FT說明書

冷凍保存細胞之方法：
人胚腎細胞；293FT說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品描述：
細胞名稱 人胚腎細胞；293FT說明書
形態(tài)特性圓

生長特性懸浮生長

特征特性該細胞穩(wěn)定表達SV40大T抗原，并且促進適病毒產(chǎn)物的產(chǎn)生。

培養(yǎng)條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；0.1mMMEMNon-Essential+AminoAcids(NEAA)+2mML-glutamine+1%Pen-Strep(optional)+500?g/mlGeneticin

傳代方法細胞密度>5×105cells/ml

傳代情況C3

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測培養(yǎng)法（-）

STRAmelogenin：X；CSF1PO：7，12；D13S317：12；D16S539：9，13；D18S51：17，18；D19S433：15，18；D21S11：30.2；D2S1338：19；D3S1358：15，17；D5S818：8，9；D7S820：11；D8S1179：12，14；FGA：23；TH01：7，9.3；TPOX：11；vWA：16，19；

同工酶

染色體

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）人胚腎細胞；293FT說明書準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
?1.一般客戶拿到人胚腎細胞；293FT說明書后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
LPS*人脂多糖/內(nèi)毒素規(guī)格48T/96T

LPL*人脂蛋白脂酶規(guī)格48T/96T

Lp-PL-A2*人脂蛋白磷脂酶A2規(guī)格48T/96T

Lp-α*人脂蛋白α規(guī)格48T/96T

LAM*人脂阿拉伯甘露聚糖規(guī)格48T/96T

RANTES*人正常T細胞表達和分泌因子規(guī)格48T/96T

ILK-1*人整合素連接激酶1規(guī)格48T/96T

ITGαM/CD11b*人整合素αM型規(guī)格48T/96T

IntegrinαⅤβ3*人整合素αⅤβ3規(guī)格48T/96T

TI*人真胰島素規(guī)格48T/96T
人胚腎細胞；293FT說明書v-maf肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗原Mafa(avian)(V-mafmusculoaponeuroticfibrosarcomaoncogenehomologA)v-maf肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗原0.5mgMafa(avian

MAG(Myelinassociatedglycoprotein;L-MAG;MAG-a)髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)0.5mgMAG(Myelinassociatedglycoprotein;L-MAG;MAG-a

MAG-a/b(Myelinassociatedglycoprotein;L/S-MAG;)髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b(抗原)0.5mgMAG-a/b(Myelinassociatedglycoprotein;L/S-MAG;

MAGE-1黑色素瘤相關(guān)MAGE-1黑色素瘤相關(guān)0.5mgMAGE-1黑色素瘤相關(guān)

微管相關(guān)蛋白1A抗原MAP1A/Mtap1a(microtubuleassociatedprotein1A)微管相關(guān)蛋白1A抗原0.5mgMAP1A/Mtap1a(microtubuleassociatedprotein1A

自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗原MAP1LC3A(microtubule-associatedprotein1lightchain3)自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗原0.5mgMAP1LC3A(microtubule-associatedprotein1lightchain3

微管相關(guān)蛋白2抗原MAP-2(microtubuleassociatedprotein2)微管相關(guān)蛋白2抗原0.5mgMAP-2(microtubuleassociatedprotein2

MAPK-1/2絲裂原活化蛋白激酶（抗原）0.5mgMAPK-1/2絲裂原活化蛋白激酶（抗原
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