細胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 細胞種類: *種: EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401價格是凍存產品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產品的質量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。 第二種: 是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。 質量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的細胞名稱、種屬、貨號、數量、協(xié)商細胞價格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。 收到EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401價格如何處理? 1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時與技(所拍照片將作為后續(xù)服務依據)。 2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。 3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。 4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據);建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。 5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。 6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401價格采用干冰運輸,經過逐步的降溫,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暫時停止其生命活動,保存其活性,使您的實驗更生動,公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌. 產品描述: 細胞名稱 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401價格 形態(tài)特性淋巴母細胞樣 生長特性懸浮生長 特征特性該細胞來源于一女性重癥肌無力患者的外周血。1994年由中國科學院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。 培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)15%NBS 傳代方法1:2傳代;5-6天一次 傳代情況P8 凍存條件基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測熒光法(-) STR- 同工酶 染色體 主要功能: (1)EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401價格血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。 (2) 表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應。 (3)與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關。 生理變化: (1)主動脈硬化。 (2)主動脈瘤 (3)主動脈鈣化。 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401價格基本特性: (1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。 (2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。 (3)原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。 (4)每凍存管細胞數:>5×105 cells/1ml。 (5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。 (6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。 以下是EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401價格的相關產品,點擊進入了解更多轉化細胞。 Cortisol*兔子皮質醇規(guī)格48T/96T FⅡ*兔子凝血因子Ⅱ規(guī)格48T/96T TR*兔子凝血酶受體規(guī)格48T/96T BNP*兔子腦鈉素/腦鈉尿肽規(guī)格48T/96T ES*兔子內皮抑素規(guī)格48T/96T eNOS-3*兔子內皮型一氧化氮合成酶3規(guī)格48T/96T ET-1*兔子內皮素1規(guī)格48T/96T ET-1*兔子內皮素1規(guī)格48T/96T IgM*兔子免疫球蛋白M規(guī)格48T/96T IgG*兔子免疫球蛋白G規(guī)格48T/96T EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401價格histoneH3-likeprotein組蛋白H3樣蛋白(C端多肽)0.5mghistoneH3-likeprotein組蛋白H3樣蛋白(C端多肽 histoneH3-likeprotein組蛋白H3樣蛋白(N端多肽)0.5mghistoneH3-likeprotein組蛋白H3樣蛋白(N端多肽 histoneH3-likeprotein組蛋白H3樣蛋白多肽histoneH3-likeprotein組蛋白H3樣蛋白多肽0.5mghistoneH3-likeprotein組蛋白H3樣蛋白多肽 HisX6聚組氨酸標簽蛋白HisX6聚組氨酸標簽蛋白0.5mgHisX6聚組氨酸標簽蛋白 HIVgp120艾滋病病毒(抗原)0.5mgHIVgp120艾滋病病毒(抗原 HIV-1(humanimmunodeficiencyvirustype1)艾滋病病毒-1/人類免疫缺陷病毒1型(抗原)0.5mgHIV-1(humanimmunodeficiencyvirustype1 HIV-1(humanimmunodeficiencyvirustype1)艾滋病病毒-1/人類免疫缺陷病毒1型(抗原)0.5mgHIV-1(humanimmunodeficiencyvirustype1 HLA-DR抗原HLA-DR(humanleukoyteAntigenDR)HLA-DR抗原0.5mgHLA-DR(humanleukoyteAntigenDR 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMYM價格準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 產品描述: 細胞名稱 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMYM價格 形態(tài)特性淋巴母細胞樣 生長特性懸浮生長 特征特性該細胞系來源于一成年女性的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。 培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)15%NBS 傳代方法1:2傳代;5-6天一次 傳代情況P2 凍存條件基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測熒光法(-) STR- 同工酶 染色體
注意事項: ?1.一般客戶拿到EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMYM價格后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。 細胞出現問題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細胞培養(yǎng)時經其它處理的,不重發(fā); (6)細胞收到2天內,未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 15-LO/LOX*小鼠15脂加氧酶規(guī)格48T/96T 1,3-βDglu*小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶規(guī)格48T/96T PSA*豌豆凝集素規(guī)格48T/96T HIS*豚鼠組胺規(guī)格48T/96T TGF-β1*豚鼠轉化生長因子β1規(guī)格48T/96T MHC/GPLA*豚鼠主要組織相容性復合體規(guī)格48T/96T TNF-α*豚鼠腫瘤壞死因子α規(guī)格48T/96T CH50*豚鼠血清總補體規(guī)格48T/96T NO*豚鼠血清一氧化氮規(guī)格48T/96T PAP*豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物規(guī)格48T/96T EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMYM價格葡萄糖轉運蛋白3抗原GLUT3(Glucosetransporter3)葡萄糖轉運蛋白3抗原0.5mgGLUT3(Glucosetransporter3 GLUT4(Glucosetransportertype4)葡萄糖轉運蛋白4(抗原)0.5mgGLUT4(Glucosetransportertype4 [Rubellavirus]風疹病毒糖蛋白多肽片段glycoprotein(E1glycoprotein)[Rubellavirus]風疹病毒糖蛋白多肽片段0.5mgglycoprotein(E1glycoprotein glypican1磷脂酰基醇蛋白聚糖-1抗原glypican1磷脂酰基醇蛋白聚糖-1抗原0.5mgglypican1磷脂酰基醇蛋白聚糖-1抗原 磷脂酰基醇蛋白聚糖-4抗原Glypican4(Glypicanproteoglycan4)磷脂酰基醇蛋白聚糖-4抗原0.5mgGlypican4(Glypicanproteoglycan4 粒細胞-巨噬細胞克隆刺激因子抗原GM-CSF(Granulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactors)粒細胞-巨噬細胞克隆刺激因子抗原0.5mgGM-CSF(Granulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactors GnRHRpeptide促性腺激素釋放激素受體抗原GnRHRpeptide促性腺激素釋放激素受體抗原0.5mgGnRHRpeptide促性腺激素釋放激素受體抗原 gp130/IL-6R白介素-6受體抗原gp130/IL-6R白介素-6受體抗原0.5mggp130/IL-6R白介素-6受體抗原 冷凍保存細胞之方法: EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMYM價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |