細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人類成纖維細胞系;CNLMG-B5538SKIN價格準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 產品描述: 細胞名稱 人類成纖維細胞系;CNLMG-B5538SKIN價格 形態特性成纖維細胞樣 生長特性貼壁生長 特征特性該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 培養條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS 傳代方法1:3傳代,3-4天傳1次 傳代情況C8 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測陰性 STR 同工酶 染色體
注意事項: ?1.一般客戶拿到人類成纖維細胞系;CNLMG-B5538SKIN價格后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 C3a*小鼠補體片斷3a規格48T/96T C4*小鼠補體蛋白4規格48T/96T C3*小鼠補體蛋白3規格48T/96T C1INH*小鼠補體1抑制物抗體規格48T/96T PDHE1*小鼠丙酮酸脫氫酶E1規格48T/96T M2-PK*小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶規格48T/96T PK*小鼠丙酮酸激酶規格48T/96T MDA*小鼠丙二醛規格48T/96T ALT*小鼠丙氨酸氨基轉移酶規格48T/96T EGF*小鼠表皮生長因子規格48T/96T 人類成纖維細胞系;CNLMG-B5538SKIN價格F1operonpositiveregulatoryprotein(NT)鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端多肽)0.5mgF1operonpositiveregulatoryprotein(NT 腦型脂肪酸結合蛋白抗原FABP(brain)(Fattyacid-bindingproteinbrain)腦型脂肪酸結合蛋白抗原0.5mgFABP(brain Fabp2(fattyacidbindingprotein2,intestinal)脂肪酸結合蛋白2(抗原)0.5mgFabp2(fattyacidbindingprotein2,intestinal 凝血因子5抗體factorV(Vcoagulationfactor)凝血因子5抗體0.5mgfactorV(Vcoagulationfactor factorVIII第八因子相關抗原(多肽片斷抗原)0.5mgfactorVIII第八因子相關抗原(多肽片斷抗原 Fas死亡結構域相關蛋白抗原FADD(Fas-associatedproteinwithdeathdomain)Fas死亡結構域相關蛋白抗原0.5mgFADD(Fas-associatedproteinwithdeathdomain 粘著斑激酶抗原FAK(Focaladhesinkinase)粘著斑激酶抗原0.5mgFAK(Focaladhesinkinase FAM3B/PANDER(PANcreaticDERivedfactor)一種新型的胰島細胞因子(抗原)0.5mgFAM3B/PANDER(PANcreaticDERivedfactor 冷凍保存細胞之方法: 人類成纖維細胞系;CNLMG-B5538SKIN價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |