產品描述: 細胞名稱 人羊膜細胞;WISH圖片 形態特性上皮細胞樣 生長特性貼壁生長 特征特性初以為這株細胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋法分析,證實該細胞是HeLa細胞污染的;角蛋白陽性。 培養條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS 傳代方法1:2~1:10傳代;每周換液2次。 傳代情況P180 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測培養法(-) STRAmelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18; 同工酶 染色體70~75,有若干變異染色體
冷凍保存細胞之方法: 人羊膜細胞;WISH圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人羊膜細胞;WISH圖片準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 AMA*小鼠抗心肌抗體規格48T/96T dsDNA*小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體規格48T/96T dsDNA*小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體規格48T/96T ASMA*小鼠抗平滑肌抗體規格48T/96T ATR*小鼠抗凝血酶受體規格48T/96T AT-Ⅲ*小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體規格48T/96T AECA*小鼠抗內皮細胞抗體規格48T/96T ADH/AVP*小鼠抗利尿激素/精氨酸加壓素規格48T/96T TRACP-5b*小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b規格48T/96T AsAb*小鼠抗抗體規格48T/96T 人羊膜細胞;WISH圖片cRaf/Raf1抗原cRaf/Raf1(c-raf1)cRaf/Raf1抗原0.5mgcRaf/Raf1(c-raf1 CREB-1(cAMPresponsiveelementbindingprotein-1)環腺苷酸應答元件結合蛋白(抗原)0.5mgCREB-1(cAMPresponsiveelementbindingprotein-1 促腎上腺皮質激素釋放因子CRF(Corticotropin-ReleasingFactor)促腎上腺皮質激素釋放因子0.5mgCRF(Corticotropin-ReleasingFactor 促腎上腺皮質激素釋放因子CRF(Corticotropin-ReleasingFactor)促腎上腺皮質激素釋放因子0.5mgCRF(Corticotropin-ReleasingFactor C端Cripto-1(C-Terminus)畸胎瘤衍化生長因子抗原(表皮生長因子相關肽)C端0.5mgCripto-1(C-Terminus N端Cripto-1(N-Terminus)畸胎瘤衍化生長因子抗原(表皮生長因子相關肽)N端0.5mgCripto-1(N-Terminus 降鈣素受體樣蛋白抗原CRLR/CALCRL(calcitoninreceptorlikeprecursor)降鈣素受體樣蛋白抗原0.5mgCRLR/CALCRL(calcitoninreceptorlikeprecursor 二氫嘧啶酶樣2CRMP2抗原CRMP2/Dpysl2(collapsinresponsemediatorprotein-2)二氫嘧啶酶樣2CRMP2抗原0.5mgCRMP2/Dpysl2(collapsinresponsemediatorprotein-2 注意事項: ?1.一般客戶拿到人羊膜細胞;WISH圖片后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 |