產品描述: 細胞名稱 人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2說明書 形態特性上皮樣 細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF說明書準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 產品描述: 細胞名稱 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF說明書 形態特性成纖維細胞樣 生長特性貼壁生長 特征特性北京眼科研究所建系。 培養條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS 傳代方法1:2~1:3傳代;3~4天1次。 傳代情況P5 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測培養法(-) STRAmelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:10,11;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:13,14;D21S11:31,32.2;D2S1338:18,19;D3S1358:15;D5S818:10,12;D7S820:11;D8S1179:10,16;FGA:18,22;TH01:7,10;TPOX:8;vWA:14; 同工酶 染色體
注意事項: ?1.一般客戶拿到人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF說明書后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 sLR*小鼠可溶性瘦素受體規格48T/96T sRANKL*小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基規格48T/96T B7-2/sCD86*小鼠可溶性白細胞分化抗原86規格48T/96T sCD40L*小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體規格48T/96T sCD30L*小鼠可溶性白細胞分化抗原30配體規格48T/96T sCD30*小鼠可溶性白細胞分化抗原30規格48T/96T sP-selectin*小鼠可溶性P選擇素規格48T/96T sE-selectin*小鼠可溶性E選擇素規格48T/96T ENG/sCD105*小鼠可溶性Endoglin規格48T/96T Gzms-B*小鼠顆粒酶B規格48T/96T 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF說明書C型鈉尿肽抗原CNP/CNPase(2',3'-cyclic-nucleotide3'-phosphodiesterase)C型鈉尿肽抗原0.5mgCNP/CNPase(2',3'-cyclic-nucleotide3'-phosphodiesterase 睫狀神經營養因子抗原CNTF(CiliaryNeurotrophicFactor)睫狀神經營養因子抗原0.5mgCNTF(CiliaryNeurotrophicFactor I型膠原蛋白CollagenI(Anti-CollagenTypeI)I型膠原蛋白0.5mgCollagenI(Anti-CollagenTypeI CollagenIII(Anti-CollagenTypeIII)抗Ⅲ型膠原抗原(CollagenⅢⅢ型膠原)0.5mgCollagenIII(Anti-CollagenTypeIII CollagenIII(Anti--CollagenTypeIII)Ⅲ型膠原抗原(CollagenⅢⅢ型膠原)0.5mgCollagenIII(Anti--CollagenTypeIII CollagenIVIV型膠原(CollagenⅣⅣ型膠原)0.5mgCollagenIVIV型膠原(CollagenⅣⅣ型膠原 CollagenV(Anti--CollagenTypeV)Ⅴ型膠原(多肽)0.5mgCollagenV(Anti--CollagenTypeV COMP軟骨寡聚基質蛋白抗原COMP軟骨寡聚基質蛋白抗原0.5mgCOMP軟骨寡聚基質蛋白抗原 冷凍保存細胞之方法: 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 生長特性貼壁生長 特征特性取材自引產的11周男性胚胎組織,由中國醫學科學院基礎醫學研究所細胞資源中心建立。 培養條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)20%FBS 傳代方法1:3傳代;3~4天1次。 傳代情況P5 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測培養法(-) STRAmelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:9,11;D16S539:11,13;D18S51:12,13;D19S433:13,14;D21S11:29;D2S1338:17,23;D3S1358:16;D5S818:9,11;D7S820:10,12;D8S1179:10,13;FGA:21,25;TH01:7,9;TPOX:8,11;vWA:14,16; 同工酶 染色體
冷凍保存細胞之方法: 人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2說明書準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 BDNF*小鼠腦源性神經營養因子規格48T/96T BNP*小鼠腦鈉素/腦鈉尿肽規格48T/96T NGB*小鼠腦紅蛋白規格48T/96T BGP/Gehrelin*小鼠腦腸肽規格48T/96T visfatin*小鼠內脂素/內臟脂肪素規格48T/96T vaspin*小鼠內臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑規格48T/96T EL*小鼠內皮脂肪酶規格48T/96T ES*小鼠內皮抑素規格48T/96T eNOS-3*小鼠內皮型一氧化氮合成酶3規格48T/96T eNOS*小鼠內皮型一氧化氮合成酶規格48T/96T 人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2說明書ChRM2(MuscarinicAcetylcholinereceptorM2)毒蕈堿型乙酰膽堿受體M2(抗原)0.5mgChRM2(MuscarinicAcetylcholinereceptorM2 ChRM2(MuscarinicAcetylcholinereceptorM2)毒蕈堿型乙酰膽堿受體(抗原)0.5mgChRM2(MuscarinicAcetylcholinereceptorM2 ChRM3peptide毒蕈堿型乙酰膽堿受體M3抗原ChRM3peptide毒蕈堿型乙酰膽堿受體M3抗原0.5mgChRM3peptide毒蕈堿型乙酰膽堿受體M3抗原 CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholinereceptoralpha7)煙堿型乙酰膽堿受體α7(多肽)0.5mgCHRNA7(Nicotinic-Acetylcholinereceptoralpha7 CIDEBpeptideCIDEB抗原CIDEBpeptideCIDEB抗原0.5mgCIDEBpeptideCIDEB抗原 C-jun/AP-1(OncoproteinC-jun:activeprotein1)原癌基因蛋白(活化蛋白1)(抗原)0.5mgC-jun/AP-1(OncoproteinC-jun:activeprotein1 peptide細胞角蛋白1/8/19抗原CK1/8/19(Cytokeratin1/8/19;Keratin1/8/19)peptide細胞角蛋白1/8/19抗原0.5mgCK1/8/19(Cytokeratin1/8/19;Keratin1/8/19 CK14/17/42/10peptide細胞角蛋白14抗原CK14/17/42/10peptide細胞角蛋白14抗原0.5mgCK14/17/42/10peptide細胞角蛋白14抗原 注意事項: ?1.一般客戶拿到人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2說明書后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 |