人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞；HK-2圖片

冷凍保存細(xì)胞之方法：
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞；HK-2圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品描述：
細(xì)胞名稱 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞；HK-2圖片
形態(tài)特性上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)

特征特性該細(xì)胞屬源于正常腎的近曲小管細(xì)胞，通過(guò)導(dǎo)入HPV-16E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16E6/E7基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN16E6/E7轉(zhuǎn)染外生包裝細(xì)胞Psi-2，Psi-2細(xì)胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細(xì)胞系PA317，后將PA317產(chǎn)生的病毒顆粒導(dǎo)入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細(xì)胞。盡管pLXSN16E6/E7中含有新霉素抗性，但未用G418篩選轉(zhuǎn)導(dǎo)克隆。Southern和FISH分析顯示HK-2細(xì)胞來(lái)源于單克隆。PCR檢測(cè)證實(shí)HK-2細(xì)胞基因組中含有E6/E7基因。

培養(yǎng)條件DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS

傳代方法1:4傳代；2~3天換液1次。

傳代情況P9

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè)培養(yǎng)法（-）

STRAmelogenin：X；CSF1PO：13；D13S317：9；D16S539：11，12；D18S51：12；D19S433：15，15.2；D21S11：28，30；D2S1338：17，25；D3S1358：16，17；D5S818：12；D7S820：10，11；D8S1179：10，14；FGA：20，22；TH01：9；TPOX：8，9；vWA：17，18；

同工酶

染色體57~60

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞；HK-2圖片準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項(xiàng)：
?1.一般客戶拿到人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞；HK-2圖片后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
OVAsIgE*小鼠卵清蛋白特異性IgE規(guī)格48T/96T

小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISAKit，48T/96T*小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISAKit，48T/96T規(guī)格48T/96T

TrxR*小鼠硫氧還蛋白還原酶規(guī)格48T/96T

Trx*小鼠硫氧化還原蛋白規(guī)格48T/96T

PIAb-IgG/IgM*小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM規(guī)格48T/96T

PL-A2*小鼠磷脂酶A2規(guī)格48T/96T

PI3K*小鼠磷酸肌醇3激酶規(guī)格48T/96T

pERK*小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶規(guī)格48T/96T

P-PKC*小鼠磷酸化蛋白激酶C規(guī)格48T/96T

小鼠淋巴細(xì)胞因子ELISAKit，48T/96T*小鼠淋巴細(xì)胞因子ELISAKit，48T/96T規(guī)格48T/96T
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞；HK-2圖片細(xì)胞角蛋白5抗原CK5(Cytokeratin5)細(xì)胞角蛋白5抗原0.5mgCK5(Cytokeratin5

CK7細(xì)胞角蛋白7CK7細(xì)胞角蛋白70.5mgCK7細(xì)胞角蛋白7

human細(xì)胞角蛋白7抗原CK7(Cytokeratin7)human細(xì)胞角蛋白7抗原0.5mgCK7(Cytokeratin7

CK8(Cytokeratin8)細(xì)胞角蛋白8（多肽）0.5mgCK8(Cytokeratin8

酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原CKIP-1(caseinkinase2interactionprotein1)酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原0.5mgCKIP-1(caseinkinase2interactionprotein1

CKLF1趨化素樣蛋白CKLF1趨化素樣蛋白0.5mgCKLF1趨化素樣蛋白

CKR-L2(Gprotein-coupledreceptor-2)G蛋白偶聯(lián)受體-2(抗原)0.5mgCKR-L2(Gprotein-coupledreceptor-2

Claudin-11peptide少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗原Claudin-11peptide少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗原0.5mgClaudin-11peptide少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗原