冷凍保存細胞之方法: SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 產品描述: 細胞名稱 SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17價格 形態特性上皮樣 生長特性貼壁生長 特征特性該細胞來源于表達SV40T抗原的293T細胞;可以產生高滴度的有感染性的逆轉錄病毒。 培養條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;4mML-glutamine 傳代方法1:4~1:8傳代;2~3天換液1次。 傳代情況 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測培養法(-) STRAmelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:17,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,16,17;D5S818:8,9;D7S820:12;D8S1179:11,12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19; 同工酶 染色體
細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17價格準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 注意事項: ?1.一般客戶拿到SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17價格后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 GP-MM*小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM規格48T/96T GP-II*小鼠糖原磷酸化酶同工酶II規格48T/96T GP-BB*小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB規格48T/96T GSK*小鼠糖原合成酶激酶規格48T/96T GR*小鼠糖皮質類固醇受體規格48T/96T GHbA1c*小鼠糖化血紅蛋白A1c規格48T/96T gp130*小鼠糖蛋白130規格48T/96T CA-2*小鼠碳酸酐酶2規格48T/96T CA*小鼠碳酸酐酶規格48T/96T PLGF*小鼠胎盤生長因子規格48T/96T SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17價格活化白細胞粘附分子抗原CD166/ALCAM(activatedleukocytecelladhesionmolecule)活化白細胞粘附分子抗原0.5mgCD166/ALCAM(activatedleukocytecelladhesionmolecule CD169抗原CD169/sialoadhesin(Sn)(Sialicacid-bindingIg-likelectin1;Siglec-1)CD169抗原0.5mgCD169/sialoadhesin(Sn CD177/NB1peptide嗜中性粒細胞抗原CD177抗原CD177/NB1peptide嗜中性粒細胞抗原CD177抗原0.5mgCD177/NB1peptide嗜中性粒細胞抗原CD177抗原 CD19CD19(B-lymphocyteantigenCD19)CD190.5mgCD19(B-lymphocyteantigenCD19 CD20(抗原)CD20(抗原)0.5mgCD20(抗原 CD24CD24抗原CD24CD24抗原0.5mgCD24CD24抗原 CD25/IL-2RA(Imterleukm-2Receptoralpha)CD25/白介素2-受體(抗原)0.5mgCD25/IL-2RA(Imterleukm-2Receptoralpha CD26CD26抗原CD26CD26抗原0.5mgCD26CD26抗原 |