產(chǎn)品描述: 細胞名稱 293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP培養(yǎng) 形態(tài)特性上皮樣 生長特性貼壁生長 特征特性 培養(yǎng)條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS 傳代方法1:2~1:3傳代。 傳代情況C3 凍存條件基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測培養(yǎng)法(-) STRAmelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9,13,14;D18S51:16,17,18,19;D19S433:17,18,OL;D21S11:28,30.2;D2S1338:18,19;D3S1358:15,16,17;D5S818:8,9;D7S820:10,11;D8S1179:12,14;FGA:22,23,24;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,17,18,19,20,21; 同工酶 染色體
冷凍保存細胞之方法: 293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 細胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP培養(yǎng)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 Pepsin*小鼠胃蛋白酶規(guī)格48T/96T 小鼠胃腸癌標志物CA199ELISAKit,48T/96T*小鼠胃腸癌標志物CA199ELISAKit,48T/96T規(guī)格48T/96T VK1*小鼠維生素K1規(guī)格48T/96T VE*小鼠維生素E規(guī)格48T/96T VD3*小鼠維生素D3規(guī)格48T/96T VD2*小鼠維生素D2規(guī)格48T/96T VD*小鼠維生素D規(guī)格48T/96T VC*小鼠維生素C規(guī)格48T/96T VB6*小鼠維生素B6規(guī)格48T/96T VB12*小鼠維生素B12規(guī)格48T/96T 293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP培養(yǎng)CC趨化因子受體3抗原CCR-3(CCchemokinereceptor3)CC趨化因子受體3抗原0.5mgCCR-3(CCchemokinereceptor3 細胞表面趨化因子受體4抗原CCR-4(C-Cchemokinereceptor4)細胞表面趨化因子受體4抗原0.5mgCCR-4(C-Cchemokinereceptor4 CCR-6/CD196peptide細胞表面趨化因子受體6抗原CCR-6/CD196peptide細胞表面趨化因子受體6抗原0.5mgCCR-6/CD196peptide細胞表面趨化因子受體6抗原 CCR-7(CCchemokinereceptor7)CC趨化因子受體7(多肽)0.5mgCCR-7(CCchemokinereceptor7 CD10抗原CD10/CALLA(NeutralEndopeptidase)CD10抗原0.5mgCD10/CALLA(NeutralEndopeptidase CD105/EndoglinCD105蛋白CD105/EndoglinCD105蛋白0.2mgCD105/EndoglinCD105蛋白 CD105/Endoglin/TGF-BetareceptorCD105/轉(zhuǎn)化生長因子β受體抗原CD105/Endoglin/TGF-BetareceptorCD105/轉(zhuǎn)化生長因子β受體抗原0.5mgCD105/Endoglin/TGF-BetareceptorCD105/轉(zhuǎn)化生長因子β受體抗原 CD117/c-kit/SCFR干細胞生長因子受體/細胞表面分化抗原(抗原)0.5mgCD117/c-kit/SCFR干細胞生長因子受體/細胞表面分化抗原(抗原 注意事項: ?1.一般客戶拿到293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP培養(yǎng)后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。 細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 |