細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)SV-40轉化肺成纖維細胞;WI38/VA13價格準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 產品描述: 細胞名稱 SV-40轉化肺成纖維細胞;WI38/VA13價格 形態特性上皮細胞樣 生長特性貼壁生長 特征特性該細胞1964年建系,源自3個月胎齡的女性胚胎的肺成纖維細胞,經SV-40轉化。 培養條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS 傳代方法1:2~1:10傳代,每周換液2次 傳代情況C2 凍存條件基礎培養基+8%DMSO+20%FBS 支原體檢測培養法(-) STR 同工酶 染色體45~89
注意事項: ?1.一般客戶拿到SV-40轉化肺成纖維細胞;WI38/VA13價格后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 ANP*小鼠心鈉肽規格48T/96T 小鼠心肌轉錄因子GATA4ELISAKit,48T/96T*小鼠心肌轉錄因子GATA4ELISAKit,48T/96T規格48T/96T CT-1*小鼠心肌營養素1規格48T/96T cTn-Ⅰ*小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ規格48T/96T cTn-Ⅰ*小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ規格48T/96T TAFI*小鼠纖溶抑制因子規格48T/96T PAI-1*小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1規格48T/96T PAI*小鼠纖溶酶原激活物抑制因子規格48T/96T PAP*小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物規格48T/96T FN*小鼠纖連蛋白規格48T/96T SV-40轉化肺成纖維細胞;WI38/VA13價格CREB結合蛋白抗原CBP(CREB-bindingprotein)CREB結合蛋白抗原0.5mgCBP(CREB-bindingprotein CBX3/HP1gamma染色盒同源物3抗原CBX3/HP1gamma染色盒同源物3抗原0.5mgCBX3/HP1gamma染色盒同源物3抗原 CBX5(ChromoboxHomolog5)CBX5(多肽)0.5mgCBX5(ChromoboxHomolog5 抗原CC16(Claracellprotein16)peptide克拉拉細胞蛋白(Clara細胞分泌蛋白)抗原0.5mgCC16(Claracellprotein16 CCK8(Cholecystokinin-8)膽囊收縮素/縮膽囊素(八肽)0.5mgCCK8(Cholecystokinin-8 CCL1/TCA3/I-309嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗原CCL1/TCA3/I-309嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗原0.5mgCCL1/TCA3/I-309嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗原 單核細胞趨化蛋白5抗原CCL12/MCP-5(C-Cmotifchemokine12)單核細胞趨化蛋白5抗原0.5mgCCL12/MCP-5(C-Cmotifchemokine12 嗜酸粒細胞趨化蛋白14抗原CCL14/HCC-1(C-Cmotifchemokine14)嗜酸粒細胞趨化蛋白14抗原0.5mgCCL14/HCC-1(C-Cmotifchemokine14 冷凍保存細胞之方法: SV-40轉化肺成纖維細胞;WI38/VA13價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |