細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]培養準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 產品描述: 細胞名稱 人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]培養 形態特性 生長特性貼壁生長 特征特性 培養條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS 傳代方法 傳代情況不詳 凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測培養法(-) STR 同工酶 染色體
注意事項: ?1.一般客戶拿到人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]培養后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 IGFBP-2*小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2規格48T/96T IGFBP-1*小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1規格48T/96T IGF-2*小鼠胰島素樣生長因子2規格48T/96T IGF-1*小鼠胰島素樣生長因子1規格48T/96T ISR-β*小鼠胰島素受體β規格48T/96T INS*小鼠胰島素規格48T/96T TAP*小鼠胰蛋白酶原激活肽規格48T/96T trypsin*小鼠胰蛋白酶規格48T/96T NOS*小鼠一氧化氮合成酶規格48T/96T FA*小鼠葉酸規格48T/96T 人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]培養BIRC5/Survivinvariant細胞凋亡抑制因子4(抗原)0.5mgBIRC5/Survivinvariant細胞凋亡抑制因子4(抗原 BKchannel(stretch-activatedKcachannel)BK通道蛋白(抗原)0.5mgBKchannel(stretch-activatedKcachannel 鈣激活鉀通道蛋白BKCachannels(calcium-activatedpotassiumchannel)鈣激活鉀通道蛋白0.5mgBKCachannels(calcium-activatedpotassiumchannel BMP4(bonemorphogeneticprotein4)骨形態發生蛋白4(抗原)0.5mgBMP4(bonemorphogeneticprotein4 骨成型蛋白受體1A抗原BMPR-1A(BoneMorphogeneticproteinReceptor-1A)骨成型蛋白受體1A抗原0.5mgBMPR-1A(BoneMorphogeneticproteinReceptor-1A BNP腦鈉素(多肽抗原)0.5mgBNP腦鈉素(多肽抗原 BNP/Biotin生物素化腦鈉素多肽BNP/Biotin生物素化腦鈉素多肽0.2mlBNP/Biotin生物素化腦鈉素多肽 B細胞特異性轉錄因子抗原BOb-1(B-celloct-bindingprotein1)B細胞特異性轉錄因子抗原0.5mgBOb-1(B-celloct-bindingprotein1 冷凍保存細胞之方法: 人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]培養冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |