冷凍保存細胞之方法: 人胚肺成纖維細胞;IMR-90說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 產品描述: 細胞名稱 人胚肺成纖維細胞;IMR-90說明書 形態特性成纖維細胞 生長特性貼壁生長 特征特性W.W.Nichols及其同事從一位16周女嬰的肺中取材,建立了人二倍體成纖維細胞株IMR-90。[22381]分裂潛能,病毒感受性和其它性質都得到了充分研究,因而這株細胞可以作為WI-38或其它標準人肺細胞株的替代株。有報道稱這株細胞在表現出衰老前可倍增58次。[22381] 培養條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優質胎牛血清,10% 傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。 傳代情況P(11+5) 凍存條件*培養基+8%DMSO 支原體檢測陰性 STR 同工酶 染色體
細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)人胚肺成纖維細胞;IMR-90說明書準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 注意事項: ?1.一般客戶拿到人胚肺成纖維細胞;IMR-90說明書后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。 細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發; (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發; (3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發; (4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發; (5)細胞培養時經其它處理的,不重發; (6)細胞收到2天內,未告知,不重發; (7)視具體情況而定。 GHRH*豬促生長激素釋放激素規格48T/96T FSH*豬促卵泡素規格48T/96T TRH*豬促甲狀腺素釋放激素規格48T/96T E*豬雌激素規格48T/96T ER*豬雌二醇受體規格48T/96T E2*豬雌二醇規格48T/96T TGEV*豬傳染性胃腸炎病毒抗體規格48T/96T SOD*豬超氧化物歧化酶規格48T/96T C3*豬補體蛋白3規格48T/96T EGF*豬表皮生長因子規格48T/96T 人胚肺成纖維細胞;IMR-90說明書α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗原Alpha-AF/Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase)α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗原0.5mgAlpha-AF/Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase 人α亞基人絨毛膜促性腺激素多肽抗原Alpha-HCG(HumanchorionicgonadotropinAlpha)人α亞基人絨毛膜促性腺激素多肽抗原0.5mgAlpha-HCG(HumanchorionicgonadotropinAlpha Alpha-Synuclein核突觸蛋白(抗原)0.5mgAlpha-Synuclein核突觸蛋白(抗原 Alpha-Synuclein核突觸蛋白(抗原)0.5mgAlpha-Synuclein核突觸蛋白(抗原 AM(Adrenomedullin;ADM)腎上腺髓質素(多肽抗原)0.1mgAM(Adrenomedullin;ADM α-甲基酰基輔酶A消旋酶抗原AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoAracemase)α-甲基?;o酶A消旋酶抗原0.5mgAMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoAracemase AMH/MISMuellerian抑制因子抗原AMH/MISMuellerian抑制因子抗原1mgAMH/MISMuellerian抑制因子抗原 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗原AMPKBeta1(AMP-activatedProteinKinasebeta-1)腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗原0.5mgAMPKBeta1(AMP-activatedProteinKinasebeta-1 |