人胚胎，皮膚，肌肉；M-22

產(chǎn)品描述：
細胞名稱 人胚胎，皮膚，肌肉；M-22
形態(tài)特性成纖維細胞樣

生長特性貼壁生長

特征特性

培養(yǎng)條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況PN5

凍存條件*培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測陰性

STR

同工酶

染色體

冷凍保存細胞之方法：
人胚胎，皮膚，肌肉；M-22冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）人胚胎，皮膚，肌肉；M-22準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
sP-Selectin*豬可溶性P選擇素規(guī)格48T/96T

ATR*豬抗凝血酶受體規(guī)格48T/96T

MIP-1α/CCL3*豬巨噬細胞炎性蛋白1α規(guī)格48T/96T

KGF*豬角化細胞生長因子規(guī)格48T/96T

TIMP-1*豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1規(guī)格48T/96T

MMP-9*豬基質(zhì)金屬蛋白酶9規(guī)格48T/96T

MMSAM*豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子規(guī)格48T/96T

OT/BGP*豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白規(guī)格48T/96T

T*豬睪酮規(guī)格48T/96T

MHB*豬高鐵血紅蛋白規(guī)格48T/96T
人胚胎，皮膚，肌肉；M-22AEG-1peptideAEG-1抗原AEG-1peptideAEG-1抗原0.5mgAEG-1peptideAEG-1抗原

Ag-ARC(ARG3.1/ARC,Activity-regulatedcytoskeleton-associatedprotein)ARC(多肽抗原)0.5mgAg-ARC(ARG3.1/ARC,Activity-regulatedcytoskeleton-associatedprotein

AGER(Advancedglycosylationendproduct-specificreceptor)晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體(抗原）0.5mgAGER(Advancedglycosylationendproduct-specificreceptor

AGEs晚期糖基化終末產(chǎn)物AGEsAGEs晚期糖基化終末產(chǎn)物AGEs50mgAGEs晚期糖基化終末產(chǎn)物AGEs

晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對照品AGEscontrolarticle(advancedglycosylationendproductscontrolarticle)晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對照品50mgAGEscontrolarticle(advancedglycosylationendproductscontrolarticle

Aggrecan軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原Aggrecan軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原0.5mgAggrecan軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原

Agrinpeptide聚集蛋白抗原Agrinpeptide聚集蛋白抗原0.5mgAgrinpeptide聚集蛋白抗原

血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗原Agtr1/AT1a(AngiotensinIIreceptor,type1a)血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗原0.5mgAgtr1/AT1a(AngiotensinIIreceptor,type1a
注意事項：
?1.一般客戶拿到人胚胎，皮膚，肌肉；M-22后，應該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。