ELISA試劑盒實驗要求: 1. 從ELISA試劑盒室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。 2. 設置標準品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標準品孔各加不同濃度的標準品50μL; 3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL; 4. ELISA試劑盒隨后標準品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體50μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。 6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 7. 所有孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。 操作注意事項 1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。 2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。 3. 預處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。 4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。 5. 所有液體組分使用前充分搖勻。 |