對各種生物結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)研究是醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域研究的重要方面,尤其是定量形態(tài)學(xué)研究。對器官的整體結(jié)構(gòu)水平形態(tài)學(xué)研究相對比較容易,比如用排水法測量肝臟的體積則可以清楚地了解正常肝臟與患有肝硬化病人肝臟的體積差別。但是隨著科學(xué)的發(fā)展,研究者越來越關(guān)心人體在微觀結(jié)構(gòu)上的形態(tài)特征。任何組織結(jié)構(gòu),如細(xì)胞、細(xì)胞間質(zhì)、細(xì)胞器以及某種染色陽性結(jié)構(gòu)等,均為具有一定形狀和空間分布的幾何物體。結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)描述包括兩個方面:一是該結(jié)構(gòu)的定性描述,二是其定量描述。免疫組織化學(xué)技術(shù)對組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)的定性研究是本書的重點(diǎn)內(nèi)容之一,而對于這些已定性的微觀結(jié)構(gòu)定量研究則成了難題,因?yàn)橥ǔV荒芡ㄟ^二維切片來觀察這些微觀結(jié)構(gòu)。定量研究的內(nèi)容包括體積、表面積、線性結(jié)構(gòu)的長度、顆粒結(jié)構(gòu)的數(shù)量等,這些內(nèi)容應(yīng)如何進(jìn)行研究呢? 20世紀(jì)80年代以來,丹麥科學(xué)家Gundersen建立的現(xiàn)代無偏體視學(xué)方法為微觀形態(tài)結(jié)構(gòu)準(zhǔn)確定量研究提供了可靠方法。當(dāng)我們談到現(xiàn)代體視學(xué)方法時,需感謝Gundersen教授對體視學(xué)的貢獻(xiàn)。因?yàn)楫?dāng)今在上廣泛應(yīng)用的現(xiàn)代方法絕大部分是由以Gundersen教授為代表的丹麥科學(xué)家發(fā)明。方法是一系列用于準(zhǔn)確獲得組織細(xì)胞和亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)三維形態(tài)定量特征的方法。在上,方法被廣泛應(yīng)用于生物 學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)。特別值得強(qiáng)調(diào)的是,新的方法已與各類組織細(xì)胞的特殊染色、免疫組織化學(xué)及分子生物學(xué)圖像(如原位分子雜交圖像)等結(jié)合起來,用于對經(jīng)過基因改造(轉(zhuǎn)基因或基因剔除)的動物模型的定量研究中。因此,方法已成為連接形態(tài)學(xué)、功能學(xué)和分子生物學(xué)研究的橋梁。 在實(shí)際應(yīng)用水平上,方法是一種基于二維切片觀察而獲得顯微結(jié)構(gòu)三維定量信息的有效手段。在統(tǒng)計(jì)概率的意義上講,二維切片包含有三維結(jié)構(gòu)的定量信息。但是,如果要使二維切片獲得的信息真實(shí)地反映三維信息,在器官、切片、視野及空間方向上的抽樣都必須滿足一些基本原則。在運(yùn)用當(dāng)中這些抽樣原則很容易實(shí)現(xiàn)。但同樣也很容易失誤。因此,基于以上所述.我們首先需明確二維切片與三維結(jié)構(gòu)的關(guān)系以及如何有效獲得二維信息,并在此基礎(chǔ)上討論獲得體積、表面積、長度和數(shù)量等三維定量信息的方法。 的優(yōu)勢在于它以三維定量數(shù)據(jù)來表達(dá)特征結(jié)構(gòu)信息,先撇開在統(tǒng)計(jì)學(xué)基礎(chǔ)上確立的抽樣原則不談,我們所用來觀察的二維切片首先應(yīng)該是包含有特征物的。而不論通過什么窗口(如光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡和激光掃描共聚焦顯微鏡等)來獲取二維切片圖像,包含特征物的器官組織均稱為參照空間,我們便是在一定參照空間內(nèi)研究特征物的三維定量信息。
|