設(shè)為主頁  |  加入收藏
新聞動(dòng)態(tài)
·嗅覺受體家族5亞基3抗體12.12年終盛典
·婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-3雙十二優(yōu)惠活動(dòng)
·標(biāo)準(zhǔn)雞血清(無菌 未經(jīng)滅活)感恩節(jié)活動(dòng)
·人橫紋肌肉瘤細(xì)胞十一月優(yōu)惠活動(dòng)
·大鼠角膜上皮細(xì)胞試劑盒?雙十一優(yōu)惠活動(dòng)如火如荼地進(jìn)行中
·MC3T3-E1 Subclone 14小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆優(yōu)惠活動(dòng)
·兔基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1elisa檢測(cè)試劑盒試劑優(yōu)惠活動(dòng)
產(chǎn)品搜索
產(chǎn)品目錄
ELISA試劑盒
細(xì)胞
血清
培養(yǎng)基
生化試劑
標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
抗體
ATCC細(xì)胞
PCR試劑盒
elisa檢測(cè)試劑盒
質(zhì)粒
定量PCR試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)
聯(lián)系我們
聯(lián)系我們
上海一研生物科技有限公司
地址:上海嘉定區(qū)澄瀏公路52號(hào)
電話:021-69985169
郵編:201102
傳真:
聯(lián)系人:高麗琴
手機(jī):13611928337
技術(shù)文章
·HEL人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞操作注意事項(xiàng)(續(xù))
·牛血清白蛋白Ⅴ 9048-46-8的溶解度和穩(wěn)定性
·大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA免費(fèi)代測(cè)試劑盒樣本處理及要求
·脫纖維驢血(無菌 pet瓶裝)操作步驟
·小鼠晶狀體上皮細(xì)胞提取物實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
 
 
資料下載 Down 您現(xiàn)在的位置:首頁 > 資料下載

豬細(xì)小病毒探針法熒光定量 PCR 試劑盒

點(diǎn)擊次數(shù):186 發(fā)布時(shí)間:2024/5/14
提 供 商: 上海一研生物科技有限公司 資料大小:
圖片類型: 下載次數(shù): 0 次
資料類型: OCX 瀏覽次數(shù): 186 次
相關(guān)產(chǎn)品:
詳細(xì)介紹: 文件下載    

豬細(xì)小病毒探針法熒光定量 PCR 試劑盒

【產(chǎn)品名稱】

商品名稱:豬細(xì)小病毒探針法熒光定量 PCR 試劑盒

Name :Porcine Parvovirus (PPV) Probe qPCR Kit

【包裝規(guī)格】50 次/盒

【產(chǎn)品及特點(diǎn)】

豬細(xì)小病毒(Porcine Parvovirus,PPV)會(huì)引起豬細(xì)小病毒病。這是一種豬繁殖

障礙病,該病主要表現(xiàn)為胚胎和胎兒的感染和死亡,特別是初產(chǎn)母豬發(fā)生死胎、畸

形胎和木乃伊胎,但母豬本身無明顯的癥狀。豬群暴發(fā)此病時(shí)常與窩仔數(shù)減少、母

豬難產(chǎn)和重復(fù)配種等臨床表現(xiàn)有關(guān)。在懷孕早期 30-50 天感染,胚胎死亡或被吸

收,使母豬不孕和不規(guī)則地反復(fù)發(fā)情,該病毒會(huì)給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失,因

此豬細(xì)小病毒的快速準(zhǔn)確鑒定對(duì)該病的預(yù)防和檢疫有著重要作用。本公司開發(fā)豬細(xì)

小病毒探針法熒光定量 PCR 試劑盒,它具有下列特點(diǎn):

1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板。

2.引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。

3.提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。

4.特異性高,引物是根據(jù)豬細(xì)小病毒 DNA 高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他微生物 DNA

發(fā)生交叉反應(yīng)。

5.既可用于定性檢測(cè),又可用于定量檢測(cè)。用于定量檢測(cè)時(shí)線性范圍至少為 5 個(gè)數(shù)

量級(jí)

6.本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 PCR 反應(yīng)。

7.本產(chǎn)品只能用于科研。

【規(guī)格及成分】

成分 包裝

2×Probe qPCR Magic Mix 500 μL(紅蓋)

熒光 PCR 專用模板稀釋液 1 mL(綠蓋)

超純水 1ml(白蓋)

豬細(xì)小病毒探針法 qPCR 引物-探針

混合液

150 μL(棕色蓋)

豬細(xì)小病毒探針法 qPCR 陽性對(duì)照

(1×10E7 拷貝/μL)

50 μL(黃蓋)

使用手冊(cè) 1 份

【運(yùn)輸及保存】

低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為 12 個(gè)月。

【自備試劑】

樣品 DNA。

【使用方法】

一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E1-10E6 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)

由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污

染樣品或本試劑盒的其他成分。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原 本產(chǎn)品不

提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供無傳染性的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。

1.標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2,1。

2.用帶芯槍頭分別加入 45μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液,最好用帶芯槍頭下同)。

3.在 6 號(hào)管中加入 5μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩 1 分

鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4.換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充

分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5.換槍頭,在 4 號(hào)管中加入 5μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充

分震蕩 1 分鐘,得 1×10E4 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7.如果有 N 個(gè)樣品待提取,最好設(shè)置 N+2 個(gè)提取,多出的一個(gè)是 PC(樣品制備

陽性對(duì)照),和 NC(樣品制備陰性對(duì)照)。可以取陽性對(duì)照的 1000 倍稀釋液 10

μL 再加上一定量的水,使總體積與待提取樣品的規(guī)定體積一致,以此作為 PC。另

外用水作為 NC。

8.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù) DNA 提取試劑盒兼容。

三、Probe qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)

9.如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)

用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用

于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其

中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模

板),1 個(gè)用于 PCR 陽性對(duì)照(用第 4 號(hào)管的陽性對(duì)照稀釋液做模板)。下面

只以定量分析為例描述操作步驟。

10.在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完

畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后最后加):

成分/每管

樣品管

N+2 個(gè)

PCR 陰

性對(duì)照管

標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品

管(1-6 管)

2×Probe qPCR Magic Mix 10 μL 10 μL 10 μL

豬細(xì)小病毒探針法 qPCR 引物-探針

混合液

3 μL 3 μL 3 μL

N+2 個(gè)待測(cè) DNA 模板 7 μL - - 超純水 - 7 μL - 第 6 步所得標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品稀釋液

(1-6 號(hào)) - - 7 μL(1 號(hào)樣到

1 號(hào)管,2 號(hào)樣到

2 管…)

11.蓋上蓋子后上機(jī),按下面參數(shù)進(jìn)行 PCR:

過程 溫度 時(shí)間

預(yù)變性 95℃ 10 min PCR 反應(yīng)

(45 個(gè)循環(huán))

95℃ 15sec 55℃ 30sec 72℃ 40sec(采集 FAM 通道的熒光信號(hào))

四、數(shù)據(jù)處理

12.如果把本試劑盒用于定量檢測(cè),則以陽性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值

為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品核酸濃度

的 log 值,再推算出其濃度。

13.如果把本試劑盒用于定性檢測(cè),只判斷陽性或陰性,則陰性對(duì)照 Ct 必須大于

或等于 40。陽性對(duì)照必須有熒光對(duì)數(shù)增長(zhǎng),有典型擴(kuò)增曲線,Ct 值應(yīng)該小于或等

于 35。對(duì)待測(cè)樣品,如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性,如果小于或等于 35 則

為陽性。如果在 35-40 之間,則重復(fù)一次。若重復(fù)實(shí)驗(yàn)的 Ct 值如果大于或等于

40 則為陰性,如果小于 40,則為陽性。


 
本站推薦產(chǎn)品:主營(yíng)產(chǎn)品:PCR檢測(cè)試劑盒、PCR試劑盒, 核酸檢測(cè)試劑盒,熒光定量檢測(cè)試劑盒,生化試劑盒 ,比色法試劑盒,酶活性檢測(cè)試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒,試劑盒,ELISA試劑盒,抗體,重組蛋白,分光光度法檢測(cè)試劑盒,細(xì)胞株,原代細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)基,標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司公司產(chǎn)品。
上海一研生物科技有限公司(www.taobaoyq.com) 版權(quán)所有 總訪問量:407993 地址:上海嘉定區(qū)澄瀏公路52號(hào) 郵編:201102
電話:021-69985169 傳真: 手機(jī):13611928337 聯(lián)系人:高麗琴 郵箱:3004994300@qq.com
技術(shù)支持:智慧城市網(wǎng) 管理登陸 ICP備案號(hào):滬ICP備14030958號(hào)-5
在線客服
021-69985169
13611928337
點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息
點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息
 

智慧城市網(wǎng)

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站