血清低密度脂蛋白(Low density lipoprotein cholesterol , LDL-C)試劑盒說明書 分光光度法50管/48樣 注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。 測定意義 低密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,與冠心病的發(fā)生和動脈粥樣硬化損傷呈正相關,是脂類疾病分類和風險預測的一個重要指標。 測定原理 用沉淀劑分離血清中的低密度脂蛋白膽gu醇,利用酯酶催化膽gu醇酯水解生成游離膽gu醇和游離脂肪酸,從而把膽gu醇酯轉化為FC;進一步利用膽gu醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替bi林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品 離心機,恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。 試劑組成和配制 試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存。 試劑二:液體40mL×1瓶,4℃保存。 試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存。臨用前加15mL試劑四充分溶解。 試劑四:液體20mL×1瓶,4℃保存。 標準品:液體1mL×1支,4℃保存。 樣品處理 取血后3小時內(nèi)分離血清,將血清樣品與試劑一按照2:1的比例充分混勻,25℃靜置15min,2000g離心15min,上清置于冰上待測。 測定操作表 空白管標準管測定管 蒸餾水(μL)20 標準品(μL)20 樣本(μL)20 試劑二(μL)750750750 試劑三(μL)250250250 混勻,37℃靜置30min,于1mL玻璃比色皿,空白管調(diào)零,測定500nm處吸光值A。分別記為A標準管和A測定管 計算公式 LDL-C含量(mmol/L)= A測定管÷A標準管×C標準管 =5×A測定管÷A標準管 C標準管:5mmol/L 注意事項 1.樣本切勿反復凍融,最好在取血后12小時內(nèi)完成測定。 2.配置好的試劑三4℃保存可半個月。 3.線性范圍為0.17mmol/L- 4.2mmol/L。
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