食油假單胞菌 血清/培養(yǎng)基菌種保藏方法: 1.斜面低溫保藏法 產(chǎn)品僅用于科研將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,待菌種生長(zhǎng)*后,置于4℃左右的冰箱中保藏,每隔一定時(shí)間(保藏期)再轉(zhuǎn)接至新的斜面培養(yǎng)基上,生長(zhǎng)后繼續(xù)保藏,如此連續(xù)不斷。此法簡(jiǎn)便易行,容易推廣,存活率高,故科研和上對(duì)經(jīng)常使用的菌種大多采用這種保藏方法。 2.石蠟油封藏法 此法是在無(wú)菌條件下,將滅過(guò)菌并已蒸發(fā)掉水分的液體石蠟倒入培養(yǎng)成熟的菌種斜面(或半固體穿刺培養(yǎng)物)上,石蠟油層高出斜面頂端lcm,使培養(yǎng)物與空氣隔絕,加膠塞并用固體石蠟封口后,垂直放在室溫或4℃冰箱內(nèi)保藏。由于液體石蠟阻隔了空氣,使菌體處于缺氧狀態(tài)下,而且又防止了水分揮發(fā),使培養(yǎng)物不會(huì)干裂,因而能使保藏期達(dá)~2年,或更長(zhǎng)。但此法不適合厭氧性細(xì)菌。 3.砂土管保藏法 適用于產(chǎn)孢子的放線菌、霉菌及形成芽孢的細(xì)菌,對(duì)于一些對(duì)干燥敏感的細(xì)菌如奈氏球菌、弧菌和假單胞桿菌及酵母則不適用。砂土管法兼具低溫、干燥、隔氧和無(wú)營(yíng)養(yǎng)物等諸條件,故保藏期較長(zhǎng)、效果較好,且微生物移接方便,經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)便。它比石蠟油封藏法的保藏期長(zhǎng),約~0年。 4.麩皮保藏法 此法以麩皮作為載體,吸附接入的孢子,然后在低溫干燥條件下保存。適用于產(chǎn)孢子的霉菌和某些放線菌,保藏期在年以上。因操作簡(jiǎn)單,經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,工廠較多采用。 5.冷凍真空干燥保藏法 簡(jiǎn)稱凍干法,通常采用保護(hù)劑制備擬保藏菌種的細(xì)胞懸液或孢子懸液于安瓿管中,再在低溫下快速將含菌樣凍結(jié),并減壓抽真空,使水升華將樣品脫水干燥,形成*干燥的固體菌塊。并在真空條件下立即融封,造成無(wú)氧真空環(huán)境,置于低溫下,使微生物處于休眠狀態(tài),而得以保藏。常用的保護(hù)劑有脫脂牛奶、血清、淀粉、葡聚糖等高分子物質(zhì)。 6.液氮超低溫保藏法 以甘油、二甲基亞砜等作為保護(hù)劑,在液氮超低溫(-96℃)下保藏。其主要原理是菌種細(xì)胞從常溫過(guò)渡到低溫,并在降到低溫之前,使細(xì)胞內(nèi)的自由水通過(guò)細(xì)胞膜外滲出來(lái),以免膜內(nèi)因自由水凝結(jié)成冰晶而使細(xì)胞損傷。此法操作簡(jiǎn)便、高效、保藏期一般可達(dá)到5年以上,是目前被*的效的菌種保藏技術(shù)之一。 |