UACC812細胞人乳腺導管瘤細胞細胞培養預準備：

首先是準備各種溶液。

*是配制溶液過程中要用到的水。水用純水，高壓滅菌之后，再去內毒素。去內毒素方法很多，*簡單可以放在烘箱180度3小時。或者過去內毒素的柱子后，高壓滅菌。

第二，各種溶液滅菌：

抗生素用去內毒素水配制后，直接過濾除菌（過0.22u濾頭）。可以用一次性無菌注射器過一次性0.22u濾頭。

現在用的培養液，如果是商業化液體培養基，不用處理。如果是粉末，需要用去內毒素水在生物安全柜（或凈工作臺）進行配制，再過濾除菌。可以先配濃縮液（如10×），過濾除菌后。再用滅菌去內毒素水稀釋成1×培養液。

第三，培養液的配制：

培養液加上合適比例的血清即可。但血清一般保存于－20℃，一般解凍是放在4℃冰箱解凍，耗時長，而且必須解決之后，才能進行培養基的配制。所以要提前幾個小時就將血清從－20℃轉入4℃，以期解凍。當然如果這一次就需要用完的話（是指用這些血清配制的培養液都用完），也可以放到37℃解凍。

第四，*重要的是保證過程中無菌。

液體必須要分裝。無論過程中用到的培養液、血清、PBS、生理鹽水、抗生素盡量分裝。分裝是為了防止污染。如果操作有誤，僅能威脅到其中一支，而非整個。

培養液、血清、PBS、生理鹽水分裝為20mL、50mL或100mL/管

抗生素可分裝為1mL/管。

分裝*先于UACC812細胞人乳腺導管瘤細胞細胞操作

第五，操作之前，培養液先放到37度的細胞培養箱里復溫。原因：盡量減少對細胞的刺激。低溫對于細胞也是一個刺激因素。

第六，操作之前，大腦先過一遍此次操作所需要用到的所有用具。將所有用具先放到無菌臺面上。減少拿入拿出的動作，保證無菌。（如果萬一發現少拿了什么，也不要緊，再加上就是。如果是槍頭盒、移液管等用具，*先用消毒酒精噴一下）。

第七，操作之前，帶著的手套先噴消毒酒精。然后再進入工作臺。等一分鐘，等手套上的酒精揮發之后再進行操作。