小鼠角膜上皮細胞培養操作規程: 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 蘇云金芽胞桿菌加拿大亞種 Bacillus thuringiensis subsp. canadensis 蘇云金芽胞桿菌科爾默亞種 Bacillus thuringiensis subsp. colmeri 蘇云金芽胞桿菌達爾可他亞種 Bacillus thuringiensis subsp. dakota 蘇云金芽胞桿菌達姆斯塔特亞種 Bacillus thuringiensis subsp. darmstadiensis 蘇云金芽胞桿菌松蜀亞種 Bacillus thuringiensis subsp. dendrolimus 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
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