腺病毒D型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒檢測(cè)方法包括以下步驟: (1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn); (2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。 其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。 其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。 步驟(2)為:待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。 其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。 人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human α1-AGP (Alpha-1-Acid Glycoprotein) ELISA Kit 人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 (ACE)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit 人激活素A(ACVA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human ACVA (Activin A) ELISA Kit 人脂聯(lián)素(ADP/Acrp30)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit 人Agouti相關(guān)蛋白(AgRP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human AgRP (Agouti Related Protein) ELISA Kit 人血管生成素(ANG)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human ANG (Angiogenin) ELISA Kit 人促血管生成素1(ANG1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit 人促血管生成素2(ANG2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human ANG2 (Angiopoietin 2) ELISA Kit 人B細(xì)胞活化因子 (BAFF/CD257)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human BAFF/CD257 (B-Cell Activating Factor) ELISA Kit 人腦源性神經(jīng)因子(BDNF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human BDNF (Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit 人骨成型蛋白2 (BMP-2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit 人骨成型蛋白4 (BMP-4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human BMP-4 (Bone Morphogenetic Protein 4) ELISA Kit 人骨成型蛋白7 (BMP-7)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human BMP-7 (Bone Morphogenetic Protein 7) ELISA Kit 人上皮型鈣黏蛋白 (E-Cad)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human E-Cad (E-Cadherin) ELISA Kit 人碳酸酐酶IX (CA9)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human CA9 (Carbonic Anhydrase IX) ELISA Kit 人胱天蛋白酶1(CASP1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human CASP1 (Caspase 1) ELISA Kit 人半胱天冬酶3(CASP3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human CASP3 (Caspase 3) ELISA Kit 人組織蛋白酶B(CTSB)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human CTSB (Cathepsin B) ELISA Kit 人組織蛋白酶V(CTSV)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human CTSV (Cathepsin V) ELISA Kit 人單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human MCP-1 (Monocyte Chemotactic Protein 1) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human MIP-1α (Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human MIP-1β (Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit 人調(diào)節(jié)正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human RANTES (Regulated On Activation, Normal T-Cell Expressed and Secreted) ELISA Kit 人單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human MCP-3 (Monocyte Chemotactic Protein 3) ELISA Kit 人嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF/CCL11)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human ECF/CCL11 (Eosinophil Chemotactic Factor) ELISA Kit 人胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human TARC (Thymus Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human MIP-3α (Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha) ELISA Kit
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