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腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒檢測方法
點擊次數:451 更新時間:2022-03-29

腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒檢測方法包括以下步驟:

(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。

步驟(2)為:待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。

人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human α1-AGP (Alpha-1-Acid Glycoprotein) ELISA Kit

人血管緊張素轉化酶 (ACE)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit

人激活素A(ACVA)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human ACVA (Activin A) ELISA Kit

人脂聯素(ADP/Acrp30)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit

人Agouti相關蛋白(AgRP)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human AgRP (Agouti Related Protein) ELISA Kit

人血管生成素(ANG)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human ANG (Angiogenin) ELISA Kit

人促血管生成素1(ANG1)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit

人促血管生成素2(ANG2)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human ANG2 (Angiopoietin 2) ELISA Kit

人B細胞活化因子 (BAFF/CD257)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human BAFF/CD257 (B-Cell Activating Factor) ELISA Kit

人腦源性神經因子(BDNF)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human BDNF (Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit

人骨成型蛋白2 (BMP-2)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit

人骨成型蛋白4 (BMP-4)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human BMP-4 (Bone Morphogenetic Protein 4) ELISA Kit

人骨成型蛋白7 (BMP-7)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human BMP-7 (Bone Morphogenetic Protein 7) ELISA Kit

人上皮型鈣黏蛋白 (E-Cad)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human E-Cad (E-Cadherin) ELISA Kit

人碳酸酐酶IX (CA9)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human CA9 (Carbonic Anhydrase IX) ELISA Kit

人胱天蛋白酶1(CASP1)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human CASP1 (Caspase 1) ELISA Kit

人半胱天冬酶3(CASP3)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human CASP3 (Caspase 3) ELISA Kit

人組織蛋白酶B(CTSB)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human CTSB (Cathepsin B) ELISA Kit

人組織蛋白酶V(CTSV)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human CTSV (Cathepsin V) ELISA Kit

人單核細胞趨化蛋白1(MCP-1)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human MCP-1 (Monocyte Chemotactic Protein 1) ELISA Kit

人巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human MIP-1α (Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha) ELISA Kit 

人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human MIP-1β (Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit 

人調節正常T細胞表達和分泌因子(RANTES)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human RANTES (Regulated On Activation, Normal T-Cell Expressed and Secreted) ELISA Kit 

人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human MCP-3 (Monocyte Chemotactic Protein 3) ELISA Kit

人嗜酸粒細胞趨化因子(ECF/CCL11)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human ECF/CCL11 (Eosinophil Chemotactic Factor) ELISA Kit

人胸腺激活調節趨化因子(TARC)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human TARC (Thymus Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit

人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α)酶聯免疫吸附測定試劑盒Human MIP-3α (Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha) ELISA Kit 


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