人轉(zhuǎn)錄因子E2F1(E2F1)elisa試劑盒洗滌方法:
1. 包被抗原:用包被液將抗原作適當(dāng)稀釋, 一般為1~10微克/孔,每孔加200微升,37℃溫育1小時(shí)后,4℃冰箱放置16~18小時(shí)。
2. 洗滌:倒盡板孔中液體,加滿洗滌液,靜放三分鐘,反復(fù)三次,將反應(yīng)板顛倒在吸水紙上,使孔中洗滌液流盡。
3. 加封閉液200微升,37℃放置一小時(shí)。
4. 洗滌同2。
5. 加被檢血清:用稀釋液將被檢血清作幾種稀釋,,每孔200微升。同時(shí)作稀釋液對(duì)照。37℃放置2小時(shí)。
6. 洗滌同2。
7. 加辣根過氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200微升, 放置37℃ 1小時(shí)。
8. 洗滌同2。
9. 加底物:鄰*二胺溶液加200ml,室溫暗處10--15分鐘。
10. 加終止液:每孔50微升。
11. 觀察結(jié)果:用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀記錄450nm讀數(shù)。 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2 人腎小管上皮細(xì)胞;HKC 人胚胎膀胱組織來源細(xì)胞;CCC-HB-2 人胚胎氣管組織來源細(xì)胞;CCC-HBE-2 人胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1 人胚肝二倍體細(xì)胞;CCC-HEL-1 人胚胎心肌組織來源細(xì)胞;CCC-HEH-2 人胚胎腸粘膜組織來源細(xì)胞;CCC-HIE-2 人胚胎胰腺組織來源細(xì)胞;CCC-HPE-2 人胚胎肌肉組織來源細(xì)胞;CCC-HSM-2 人葡萄膜黑色素細(xì)胞;UM 人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38] SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞(亞系);293T/17 293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA 293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP 人永生化表皮細(xì)胞;HaCaT SV-40轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞;WI38/VA13 人乳腺上皮細(xì)胞;MCF-10A 人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5 人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS 人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17 人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293] 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC 人肺細(xì)胞;HLF-a 人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38] 人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810] 人胚肺成纖維細(xì)胞;HFL1 人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293] 人羊膜細(xì)胞;HA 人胚肺成纖維細(xì)胞;HFL-I 人肝細(xì)胞;HL-7702[L-02] 人肝細(xì)胞;QSG-7701 [QSG7701] 人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]
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