鵝雌二醇ELISA檢測試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。 2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。 5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 7. 溫育:操作同3。 8. 洗滌:操作同5。 9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。 11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。 小鼠磷脂酶A2(mouse sPLA2) 小鼠Pleiotrophin(mouse Pleiotrophin) 小鼠P53蛋白(mouse P53) 小鼠趨化因子(mouse RANTES) 小鼠抵抗素(mouse Resistin) 小鼠可溶性破骨細胞異化因子(mouse sRANKL) 小鼠血清淀粉樣蛋白(mouse SAA) 小鼠S-100蛋白(mouse S-100) 小鼠性激素結合球蛋白(mouse SHBG) 小鼠超氧化物歧化酶(mouse SOD) 小鼠生長抑素(mouse Somatostatin) 小鼠生長抑素受體亞型(mouse SSTR2) 小鼠干細胞生長因子(mouse SCF) 小鼠基質細胞衍生因子-1(mouse SDF-1) 小鼠基質細胞衍生因子-1a(mouse SDF-1a) 小鼠基質細胞衍生因子-1R(mouse SDF-1R) 小鼠可溶性E-選擇素(mouse sE-Selectin/sCD62E) 小鼠可溶性L-選擇素(mouse sL-Selectin/sCD62L) 小鼠可溶性P-選擇素(mouse sP-Selectin/sCD62P) 小鼠P物質(mouse Substance P) 小鼠催乳素(mouse PRL) 小鼠孕酮(mouse PROG) 小鼠睪酮(mouse TESTO) 小鼠胸腺活化調節趨化因子(mouse TARC) 小鼠凝血酶抗凝血酶復合物(mouse TAT) 小鼠組織因子(mouse TF) 小鼠組織因子抑制物(mouse TFPI)
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