在常見的試劑實(shí)驗(yàn)中,我們經(jīng)常會(huì)用到血清作為實(shí)驗(yàn)樣本,那么血清的血涂片的質(zhì)量控制是zui緊要的一步,以下要求少一步都不行。
1.血膜片的質(zhì)量要求是厚薄均勻適度,低倍鏡下觀察全片,細(xì)胞不重疊,頭尾及 兩側(cè)有一定的空隙,血膜頭部有明確的病人標(biāo)志。
2.些體積較大的特殊細(xì)胞常在血膜的尾部出現(xiàn),因此蠟筆劃線時(shí)應(yīng)注意保存血膜 尾部細(xì)胞,血膜必須充分干燥,否則在染色過(guò)程中容易脫落。
3.配制染料須用甲醇,稀釋染液用緩沖液,因?yàn)榫彌_液的pH 對(duì)細(xì)胞染色的影響很重要。在偏酸性環(huán)境中正電荷增多,在偏堿性環(huán)境中負(fù)電荷增多,又因?yàn)榧?xì)胞著色 對(duì)氫離子濃度十分敏感。如果染色偏堿,原是紫紅色的中性顆粒則染成深藍(lán)色,造成識(shí) 別困難。沖洗須用中性水,雖亦可用自來(lái)水 (但不能保持穩(wěn)定)。
4.對(duì)所用染液應(yīng)進(jìn)行預(yù)染試驗(yàn),新配制的染液放置一段時(shí)間后其中的美藍(lán)逐漸氧 化成天青B ,天青B 對(duì)細(xì)胞核的著色效果比美藍(lán)好,因此,瑞氏染液放置時(shí)間越長(zhǎng)染色 效果越好,臨床上稱之為成熟。判斷染液成熟程度的簡(jiǎn)易方法是用正常血片做預(yù)染 試驗(yàn),先用低倍鏡觀察載有染液的血片,認(rèn)為著色滿意后,再按照染色后沖洗順序zui后 用油鏡鏡檢,這樣不僅可了解染液的成熟程度,而且還可以選擇合適的染色時(shí)間,供臨 床標(biāo)本染色時(shí)參考。
5.染液與緩沖液的比例要適當(dāng),以1∶27 為宜。一般說(shuō)來(lái)緩沖液稀釋度愈大,染色 時(shí)間愈長(zhǎng),細(xì)胞著色愈勻稱、鮮艷。緩沖液和染液量要充足,否則染液很快蒸發(fā),染料 沉淀于細(xì)胞上,使細(xì)胞深染而無(wú)法檢查。細(xì)胞較多較厚的涂片 (如紅細(xì)胞增多癥) 染液 應(yīng)多些。細(xì)胞較少的涂片染液應(yīng)少些。
6.染色時(shí)間與染液濃度、室溫高低、細(xì)胞多少有關(guān),染液愈淡,室溫越低,細(xì)胞 愈多,所需時(shí)間越長(zhǎng),應(yīng)適當(dāng)增加染液濃度,因此必須根據(jù)情況靈活掌握。
7.染色良好的血膜片,外觀呈淺紅色,紅細(xì)胞呈粉紅色,白細(xì)胞核呈暗紫紅色, 染色質(zhì)結(jié)構(gòu)能辨,粒細(xì)胞的顆粒呈固有種異顏色。
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