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原位雜交組織對照
點擊次數:1268 更新時間:2015-07-22


   為證明原位雜交實驗操作的準確性和實驗結果的可靠性,必須設置一系列對照實驗。對照實驗的設置應根據核酸探針和靶核酸的種類以及現有的可能條件選定。一般應在下述幾種對照實驗中選擇3~4種,以證實雜交結果的可信性。
 
    組織對照

    1.Southern或Northern印跡反應  原位雜交能在組織細胞原位顯示待測核酸(DNA或RNA)的存在。為了進一步證實原位雜交所顯示的核酸是否存在于被檢組織內,可從被檢組織中提取DNA或總RNA,然后分別用Southern或Northern印跡法進行檢測。一般情況下,Southern或Northern印跡反應結果與原位雜交結果一致,兩者互相支持。但是,當陽性細胞在被檢的組織中所占比例很小時,原位雜交結果可能為陽性,而印跡反應則由于靶核酸的含量太低而呈陰性結果。

    2.免疫組織化學  如果能獲得靶基因產物抗體,可結合免疫組織化學方法,從蛋白質(或多肽)水平在相鄰切片或同一切片中證明蛋白 質(或多肽)和相應的mRNA共存于同一細胞中。

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