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幾大類組織的取材技術
點擊次數(shù):1115 更新時間:2015-05-14


(一)血液細胞的取材
 
血液及淋巴組織中的血細胞、淋巴細胞的取材,一般多抽取靜脈外周血,ELISA試劑盒或從淋巴組織中(如脾、扁桃體、胸腺、淋巴結等)分離細胞,取材時應注意抗凝,通常采用肝素抗凝,常用肝素濃度為8~10u/mL血,抽血的針筒也要用肝素濕潤,若從血站取來的獻血員的血液,因血站不用肝素抗凝劑,常用含枸椽酸鹽抗凝,對此類血標本千萬不能用含鈣、鎂離子的洗液來處理細胞,因此時的鈣、鎂離子可加速血液中凝血酶促進血液凝固而影響收獲血細胞及淋巴細胞。此外要嚴格無菌,盡量新鮮使用。
 
(二)骨髓、羊水、胸/腹水細胞取材
 
取上述標本時,除嚴格無菌,注意抗凝外,ELISA試劑盒還要盡快分離培養(yǎng),一般無需其他處理,離心后,用無鈣、鎂PBS洗兩次,再用培養(yǎng)液洗一次后即可培養(yǎng),不宜低溫存放。具體操作詳見后面有關章節(jié)。
 
(三)動物組織取材
 
1、鼠胚組織取材
 
首先用引頸或氣管窒息致死法處死孕期合適的動物,然后將其整個浸泡在含有75%酒精的燒杯中,5分鐘后(注意時間不能太長,以避免酒精從口或其他通道進入體內(nèi),影響組織活力),取出動物,在消毒過的木板上可用無菌的圖釘或大頭針固定四肢,切開皮膚,用無菌操作法解剖取胚或用無菌止血鉗挾起皮膚、用無菌眼科剪沿軀干中部環(huán)形剪開皮膚,用止血鉗分別挾住兩側皮膚拉向頭尾,把動物反包,暴露軀干,然后再固定,更換無菌解剖器材,采用無菌操作法解剖取出胚胎。
 
2、幼鼠胚腎(或肺)取材
 ELISA試劑盒
幼鼠采用上述方法處死消毒后,腹部朝上固定在木板上,先切開游離毛皮并拉開至兩側:然后采用無菌法打開胸腔取肺,或背部朝上固定在木板上,先將背部毛皮切開游離并拉向兩側,然后采用無菌法從背部打開腹腔取腎。

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